Investigação epidemiológica, imunológica e molecular de Leishmania (Leishmania) chagasi em carrapatos Rhipicephalus sanguineus em cães dos estados de São Paulo e Mato Grosso do Sul

Resumo

Este estudo tem como primeiro objetivo conduzir um inquérito epidemiológico por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) que permita a detecção de Leishmania (Leishmania) chagasi em carrapatos Rhipicephalus sanguineus individuais provenientes de cães positivos e negativos para leishmaniose visceral canina por métodos sorológicos, parasitológicos e moleculares. O segundo objetivo será determinar o papel do carrapato como hospedeiro intermediário do protozoário supracitado. Um total de 99 cães serão utilizados, sendo 66 soropositivos para este agente provenientes de dois municípios endêmicos (33 de Araçatuba, São Paulo (SP) e 33 de Campo Grande, Mato Grosso do Sul) e 33 sorologicamente negativos (provenientes de Jaboticabal, SP, área não endêmica). Estes animais serão de ambos os sexos, de diferentes padrões raciais e com idade superior a ano. Amostras de sangue serão processadas pela técnica de Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e pelo teste imunoenzimático (ELISA). Punções aspirativas serão efetuadas para realização do exame parasitológico direto "imprint" de linfonodos e posteriormente este material será examinado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Um total de 10 carrapatos da espécie R. sanguineus serão colhidos de cada cão. DNA genômico será purificado de intestinos, ovários, glândulas salivares e ovos de carrapatos individuais e o ensaio por PCR será usado para verificar a presença ou ausência de L. (L.) chagasi. Também será efetuada a reação de imunohistoquímica destes mesmos órgãos. Devido a inexistência de levantamentos epidemiológicos a respeito da ocorrência deste protozoário nesta espécie de carrapato e pela indefinição de seu papel como hospedeiro intermediário, justifica-se a realização desta pesquisa. (AU)