Efeitos da terapia fotodinâmica na expressão dos genes SAP5, PLB1 e LIP9 em Candida albicans

Resumo

Com o crescente aumento de cepas de Candida spp. resistentes a antifúngicos, torna-se importante e necessário a realização de pesquisas que avaliem os efeitos de novos métodos terapêuticos (TFD) sobre fatores de virulência desse gênero, como a produção das enzimas hidrolíticas aspartil-proteinase (SAP) lípase (LIP) e fosfolipase (PL). Assim, o objetivo deste estudo será verificar os efeitos da terapia fotodinâmica sobre biofilmes de Candida albicans, avaliando seus efeitos sobre a expressão dos genes SAP5, PLB1 e LIP9 pela levedura. Serão utilizadas cepas clínicas de Candida albicans (n=9) que foram isoladas de pacientes portadores do vírus HIV e uma cepa padrão ATCC 18804, que estão armazenadas no laboratório de Microbiologia e Imunologia da Faculdade de Odontologia de São José dos Campos/UNESP. A quantificação da expressão dos genes será relacionada à produção de enzimas hidrolíticas (SAP, PLB e LIP) nas amostras clínicas e na cepa de referência utilizando-se o ensaio de RT-PCR em tempo real. A presença e a expressão dos genes serão analisadas antes e após a terapia fotodinâmica. Para terapia fotodinâmica será utilizado laser de gálio-alumínio-arseneto de baixa potência (vermelho visível, 660 nm) como fonte de luz e o corante azul de metileno a 300 µM, como fotossensibilizador. Serão avaliados quatro grupos experimentais, em triplicata, para cada cepa: a) F+L+: sensibilização com azul de metileno e irradiação com laser; b) F+L-: somente tratamento com azul de metileno; c) F-L+: somente irradiação com laser e d) F-L-: grupo controle, sem sensibilização com azul de metileno e ausência de luz. Os resultados obtidos serão analisados estatisticamente (p< 0.05).