GENES DE Candida albicans COM FUNÇÃO DESCONHECIDA QUANTO À FORMAÇÃO DE BIOFILME, CARACTERÍSTICAS BIOLÓGICAS E INTERAÇÃO PATÓGENO-HOSPEDEIRO

Resumo

O objetivo do presente estudo será analisar 9 genes de Candida albicans com função desconhecida, dentre 34 cepas mutantes que apresentarem fenótipo alterado para formação de biofilme, quanto à viabilidade, peso seco, atividade metabólica e arquitetura do biofilme, características biológicas e testes em modelos de infecção. Os biofilmes serão formados em placas de 96 poços ou discos de poliestirenos e avaliados em diferentes tempos de desenvolvimento. As cepas mutantes e complementadas serão avaliadas quanto à susceptibilidade a agentes estressantes, crescimento sob limitação de nutrientes e testes de filamentação. Para os modelos de infecção, células epiteliais (TR-146) e células endoteliais (HUVEC) serão utilizadas para análise de aderência, invasão e dano pelas cepas mutantes e complementada. Será verificada a virulência das cepas em ensaios de sobrevivência de macrófagos e a morte de C. albicans por neutrófilos. A patogenicidade será avaliada em ovos embrionados de galinha durante 7 dias, após a inoculação das cepas. De acordo com os resultados obtidos, será selecionada 1 ou 2 cepas mutantes para análise específica e detalhada de genes/proteínas correspondentes. Os resultados serão analisados por ANOVA, teste de Tukey, teste t de Student, testes de Log-rank (Mantel-Cox) e Gehan- Breslow- Wilcoxon (P d 0,05).