Estabelecimento de modelo de tumores de células germinativas em testículos de ratos Sprague-Dawley

Resumo

Os tumores de células germinativas testiculares (TTCG) representam mais de 90% dos tumores testiculares no homem e a sua incidência mundial tem aumentado, inclusive no Brasil. Suas causas imediatas não são conhecidas, porém, o criptorquidismo ocorre em 10% dos casos. Não existe um modelo experimental que permita a avaliação da história natural dos TTCG, de modo que o objetivo deste projeto é estabelecer este modelo em ratos Sprague-Dawley. A influência de fatores exógenos no aparecimento dos TTCG torna-se cada vez mais evidente. Atenção especial tem sido dada às substâncias desreguladoras endócrinas como a acrilamida e os ftalatos. Além deles, o quimioterápico ciclofosfamida tem reconhecida ação genotóxica para células germinativas de humanos e de rato e pode ser ferramenta útil no estudo da carcinogênese testicular. Ratas prenhas serão alternativamente expostas via oral a ciclofosfamida, ao ftalato DBP e a acrilamida (5.0, 500.0 e 10.0 mg/kg/dia, respectivamente) durante os períodos gestacional (gavage) e lactacional (ração). Após indução cirúrgica do criptorquidismo e orquidopexia a prole masculina continuará recebendo os xenobióticos, via ração, nas mesmas concentrações que suas progenitoras, por 10, 25 e 52 semanas. Em momentos variados após as cirurgias, esses animais terão avaliados o perfil hormonal sérico (FSH, LH e ²-HCG), as morfologias do testículo, próstata, vesícula seminal, hipófise e fígado e o perfil imunohistoquímico dos testículos (OCT3/4, DAZL, BrdU, caspase-3, PLAP, c-KIT, vimentina e citoqueratina). Células de seminoma humano mantidas em cultura, TCam-2, e células germinativas testiculares de ratos expostos ao DBP por 25 e 52 semanas serão co mparadas quanto ao seu perfil de expressão gênica com auxílio da técnica de qRT-PCR. Esta análise molécular objetiva verificar se células de animais submetidas ao protocolo experimental desenvolverem o mesmo perfil de expressão gênica que os tumores humanos de células germinativas. (AU)