Sequenciamento completo de plasmídeos de alto peso molecular carreando genes de resistência a antibióticos em Enterobacteriaceae

Resumo

A maior parte da resistência bacteriana aos antibióticos se deve à aquisição de elementos extracromossômicos de outras bactérias, que incluem transposons, integrons, plasmídeos e profagos, que são trocados entre as bactérias por processos como transformação, conjugação e transdução. Plasmídeos são os elementos genéticos móveis mais relevantes, pois tem a capacidade de promover a transferência horizontal de genes entre bactérias de diferentes gêneros através da conjugação. Os principais genes de resistência a antibióticos ²-lactâmicos e fluoroquinolonas, estão localizados em plasmídeos em conjunto com outros determinantes de resistência. Alguns métodos são utilizados para a tipagem de plasmídeos presentes em Enterobacteriaceae e em Acinetobacter ssp., como a tipagem de replicons por PCR (PBRT e AB-PBRT, respectivamente), porém alguns plasmídeos são difíceis de identificar e classificar, ou não são contemplados por esses esquemas e necessitam de abordagens mais "agressivas", como o sequenciamento completo de DNA. Nesse estudo será aplicada a técnica de pirossequenciamento, que permite o sequenciamento completo de plasmídeos. A estratégia usada na Itália para plasmídeos de enterobactérias poderá ser base para estudos posteriores de sequenciamento de plasmídeos de bactérias não-fermentadoras de glicose, como Pseudomonas aeruginosa. (AU)