Efeitos da adição de IGF-1 ou IGF-LongR3 sobre aspectos celulares e moleculares durante a maturação in vitro de oócitos bovinos

Resumo

Apesar de 80% dos oócitos maturados in vitro serem fertilizados com sucesso, apenas 30 a 40% de blastocistos são produzidos a partir de oócitos após a maturação in vitro (MIV), fertilização e cultivo dos embriões bovinos. Um dos maiores desafios que permanece nos campos da biologia reprodutiva é o entendimento global dos processos moleculares e celulares que controlam a competência oocitária. Estudos envolvendo a adição de substâncias promotoras de crescimento ao meio de maturação, dentre as quais se destaca a família dos fatores semelhantes à insulina (IGFs), tem merecido destaque. O IGF-1 e outros fatores de crescimento estão envolvidos no controle do desenvolvimento folicular, da maturação oocitária e do subsequente desenvolvimento embrionário em várias espécies, incluindo a bovina. O fator semelhante à insulina-1 recombinante-3 (IGF-LongR3) é um análogo do IGF-1 amplamente utilizado em sistemas de cultivo de folículos e células da granulosa e apresenta afinidade mil vezes menor pelas proteínas de ligação ao IGF (IGFBPs), o que garante maior biodisponibilidade. No entanto, ainda não há estudos sobre os efeitos do IGF-LongR3 na maturação in vitro de oócitos bovinos. Desta forma, este trabalho tem como objetivo avaliar e comparar a progressão meiótica utilizando a coloração com Hoescht-33342, a apoptose pelo ensaio de TUNEL e o perfil gênico em oócitos (GDF9, BMP15, histona H2A, PDE3, OOSP1) e em células do cumulus (FSHR, EGFR, Ampiregulina, Receptor de P4 e COX2) por RT-qPCR em complexos cumulus-oócito (CCOs) bovinos, após o processo de maturação in vitro com o hormônio IGF-LongR3 ou com IGF-1. Conforme já demonstrado para o IGF-1, espera-se que o IGF-LongR3 quando adicionado ao meio de maturação, melhore a maturação oocitária in vitro, porém de forma mais eficiente que o IGF-1, por sua maior biodisponibilidade, podendo, desta forma, aumentar o número de oócitos aptos à fertilização e posteriormente, quiçá, a produção de embriões bovinos viáveis in vitro. (AU)