Estudo genético-molecular por sequenciamento de nova geração de pacientes com diagnóstico clínico de MODY (Maturity onset diabetes of the Young)

Resumo

O diabetes mellitus monogênico do jovem, mais conhecido como MODY (Maturity Onset Diabetes of the Young) corresponde a 1-2% de todos os casos de diabetes mellitus, configurando um número significativo de casos, já que se trata de um subtipo de uma doença altamente prevalente no Brasil e no mundo. MODY é caracterizado por defeito na secreção de insulina, herança autossômica dominante, hiperglicemia de início precoce (geralmente antes dos 25 anos) e anticorpos anti-célula beta negativos. Os pacientes com MODY se apresentam com grande heterogeneidade clínica e genética e são frequentemente confundidos com diabetes tipo 1 ou tipo 2. O diagnóstico de MODY tem grande relevância terapêutica e prognóstica, no entanto, a sua confirmação só pode ser feita por exame genético-molecular. Diante das dificuldades de realização rotineira do teste genético (principalmente pelo elevado custo), a maioria dos pacientes com MODY não é diagnosticada. Até o momento, já foram descritas mutações em 13 diferentes genes. Mutações nesses genes são encontradas em até 80% dos casos com fenótipo de MODY. Usualmente, o diagnóstico molecular de MODY é feito por sequenciamento tradicional do gene associado a cada subtipo, sendo direcionado pelo fenótipo. O sequenciamento de nova geração (NGS) mostra-se promissor para tornar a análise genética custo-efetiva na suspeita de MODY e para identificação de novos genes associados a esse fenótipo. Objetivos: Desenvolver e validar uma nova metodologia para diagnóstico genético-molecular de MODY utilizando plataforma de sequenciamento de nova geração. Correlacionar os achados moleculares às características clínicas dos pacientes com fenótipo de MODY. Pacientes e métodos: Serão estudados 60 casos com suspeita clínica de MODY. Será realizado o sequenciamento simultâneo da região codificadora e intrônica dos 13 genes associados a MODY (MiSeq, Illumina, Inc.). Nos casos em que nenhuma mutação for identificada nos 13 genes selecionados, será realizado sequenciamento exômico de 32 genes previamente relacionados a outras formas de diabetes monogênico. A inclusão de genes candidatos pode permitir a identificação de novos genes associados a MODY. Os resultados obtidos por NGS serão validados por sequenciamento de Sanger e/ou amplificação por ligação de múltiplas sondas (MLPA). As mutações identificadas serão correlacionadas com o fenótipo e as novas mutações serão avaliadas em controles normais e se necessário por estudo funcional. (AU)