Utilização de camundongos Dicer KO músculo-específico para avaliação do efeito da depleção global de microRNAs durante a hipertrofia, atrofia e envelhecimento

Resumo

mmicroRNAs (miRNAs) regulam a expressão gênica pós-transcricionalmente, degradando mRNAs ou inibindo sua tradução. Estas moléculas são processadas por importantes enzimas como a Dicer que clivam os pré-miRNAs tornando-os miRNAs maduros. Sabendo da importância destas moléculas no controle de diversos mecanismos celulares, como o controle da massa muscular, vários trabalhos têm procurado investigar o real papel dos miRNAs nesses processos fisiológicos através de estudos funcionais (knockout) in vivo e in vitro. Entretanto, essas moléculas atuam em conjunto em diversas vias de sinalização celular, tornando complexo o entendimento de como os miRNAs se comportam, em conjunto, nos processos de adaptação muscular. Desta forma, para melhor compreender o papel dos miRNAs no controle da massa muscular, o objetivo desse projeto será investigar efeito da depleção global de microRNAs durante os processos de hipertrofia, atrofia e envelhecimento utilizando um modelo Knockout músculo-específico da Dicer. Os animais serão subdivididos nos grupos Sham (n=10, aplicação de veículo nos camundongos) e knockout (aplicação de tamoxifeno para indução da deleção da Dicer) nos seguintes grupos experimentais: Animais submetidos ao processo de hipertrofia (ablação do músculo sinergista, n=10), animais submetidos à atrofia muscular (suspensão dos membros, n=10) e animais envelhicidos (24-26 meses, n=10). Ao término do experimento os animais serão sacrificados, os músculos (sóleo e plantar) removidos e, posteriormente, submetidos às análises morfológica, histoquímica e molecular (RT-qPCR e Western Blot). Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística apropriada. (AU)