Efeito do trimetafosfato de sódio, associado ou não ao fluoreto, no biofilme total e fluido do biofilme formado in vitro

Resumo

O presente estudo tem por objetivo verificar o efeito do trimetafosfato de sódio (TMP), associado ou não ao fluoreto (F), sobre as concentrações de F, cálcio (Ca) e fosfato (Pi) em biofilmes mistos de S. mutans e C. albicans (biofilme total e fluido do biofilme) formados in vitro, bem como sobre células cultiváveis, biomassa total, atividade metabólica e composição da matriz extracelular destes biofilmes. Serão preparadas soluções de TMP nas concentrações de 0,25, 0,5 e 1% com e sem F (500 ppm F). Como controles serão utilizadas soluções contendo 500 e 1100 ppm F, e saliva artificial como controle negativo. Em seguida serão cultivadas culturas de S. mutans ATCC 25175 e C. albicans ATCC 10231 para obtenção das concentrações de 108 e 107 células/mL, respectivamente, em saliva artificial. Também serão determinadas as menores concentrações de TMP capazes de inibirem o crescimento de S. mutans e de C. albicans após 24 horas. Todos os ensaios serão realizados em triplicata em três ocasiões diferentes. Os biofilmes formados no fundo de poços de placas de microtitulação serão tratados duas vezes ao dia por 1 minuto e mais uma vez no dia seguinte. Após esse período serão realizadas as análises de quantificação das células cultiváveis e da biomassa total, avaliação da atividade metabólica das células e análise da composição da matriz extracelular em termos de proteínas e carboidratos. Ainda, após o período de tratamento, o F, Ca e Pi no biofilme total e no fluido do biofilme serão quantificados. Os dados serão analisados quanto à sua distribuição (normalidade e homogeneidade) antes da determinação do teste estatístico apropriado. Caso seja possível o uso de testes paramétricos, os dados serão analisados por ANOVA (medidas repetidas) e teste de Student-Newman-Keuls. Caso contrário, serão utilizados os testes de Kruskall-Wallis e Dunn. Será realizada análise de regressão linear a fim de verificar a relação entre Ca, Pi e F nas amostras analisadas. O nível de significância adotado será de 5%.