Reparo ósseo peri-implantar em tíbias de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) tratados com losartan: análise biomecânica, molecular, microtomográfica, dinâmica óssea por fluorocromos, imunoistoquímica e histológica

Resumo

O objetivo deste estudo será investigar a dinâmica do metabolismo ósseo da interface osso/implante em ratos SHR que terão a instalação de implantes, e analisar como o tratamento com losartan pode influenciar no padrão de resposta do tecido ósseo. Material e Métodos: 96 ratos machos serão utilizados, sendo 48 naturalmente hipertensos (SHR) e 48 normotensos (Wistar). Será realizada a cirurgia para instalação de um implante em uma tíbia por animal. As análises serão divididas por grupos: Grupo A, as tíbias (n=8) serão utilizadas para a análise biomecânica por torque reverso, após a remoção do implante, essas tíbias serão colhidas para análise de PCR em tempo real. Grupo B, as tíbias (n=8) serão utilizadas para a análise por escaneamento microtomográfico, e em seguida serão submetidas ao processo de inclusão em resina fotopolimerizável para confecção das lâminas pelo sistema de corte calcificado EXAKT, assim essas lâminas obtidas serão utilizadas para a realização da análise em microscopia confocal para avaliar a dinâmica do tecido ósseo da dinâmica óssea dos 14 e 42 dias marcados pela aplicação de fluorocromos (calceina/vermelho de alizarina: 20mg/kg); para a análise histométrica, as imagens fotografadas pelo microscópio confocal serão submetidas as mensurações de área de precipitação dos fluorocromos (calceína e alizarina) na região peri-implantar e, em seguida as mesmas lâminas serão submetidas à coloração por azul de Stevenel e vermelho de alizarina, para a mensuração da extensão linear de contato osso/implante (ELCOI) e área de osso neoformado (AON). Grupo C, as tíbias (n=8) serão submetidas ao processo de descalcificação para inclusão em parafina e montadas as lâminas com cortes semi-seriados em que serão utilizados para análise imunoistoquímica com anticorpos contra o fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF), osteoprotegerina (OPG), ativador do receptor nuclear kappa B ligante (RANKL) e osteocalcina (OC); parte das lâminas dos tecidos descalcificados serão utilizadas para análise histológica, em será avaliada a qualidade do tecido ósseo, maturação, processo inflamatório e morfologia celular. Todos os resultados quantitativos serão submetidos a análise estatística adotando-se um nível de significância de 5%. (AU)