Adsorção de IgG humana em criogel monolítico de acrilamida/alginato com o-fosfotirosina (OPT) imobilizado

Resumo

Anticorpos (imunoglobulinas) são glicoproteínas empregadas nas áreas analítica, diagnóstico, biossensores, proteômica e terapêutica. A purificação dessas moléculas é fundamental, uma vez que para estas aplicações, normalmente, é necessário preparações homogêneas de anticorpos. A necessidade de grandes doses de anticorpos, para os tratamentos terapêuticos, levaram os pesquisadores a desenvolver novos processos de separação cromatográfica de imunoglobulinas. Um dos desenvolvimentos neste campo nas últimas décadas, é a cromatografia em leitos monolíticos. Devido a sua estrutura macroporosa, estes leitos apresentam propriedades adequadas para purificação de macromoléculas, como baixa resistência ao fluxo através da coluna e a transferência de massa governada principalmente por convecção. Visto isso, este projeto visa o desenvolvimento de um adsorvente a base de acrilamida, alil diglidil éter e alginato, preparado pela técnica de crio-polimerização, para ser empregado como fase estacionária monolítica para a adsorção de IgG humana. O ligante pseudobioespecífico orto-fosfotirosina (OPT) será imobilizado neste criogel, uma vez que nosso grupo de pesquisa demonstrou que este ligante adsorveu seletivamente IgG a partir do plasma humano. Os criogéis preparados a base de acrilamida e alginato serão caracterizados quanto à porosidade, morfologia e absorção de água. Também serão avaliados a capacidade de adsorção de IgG a partir do soro humano e será identificado a porção da IgG (Fab ou Fc) adsorvida no ligante imobilizado. (AU)