Monitoramento clínico, microbiológico e imunológico de pacientes submetidos à terapia endodôntica com diagnóstico de Pulpite irreversível

Resumo

A Pulpite Aguda Irreversível (PAI) é uma condição patológica da polpa dentária que tem como principal fator etiológico a presença do biofilme bacteriano e diferentes Mediadores Químicos da Inflamação (MQI), capazes de gerar respostas exacerbadas ao hospedeiro. O presente estudo visa: 1) investigar a presença, estabelecer a estrutura da comunidade microbiana e quantificar Micro-Organismos (MO) nas diferentes etapas da terapia endodôntica por métodos moleculares e cultura-dependentes; 2) monitorar o efeito do Preparo Químico-Mecânico (PQM) e da Medicação Intracanal (MIC) nos níveis de endotoxinas (LPS), ácido lipoteicóico (LTA) e nos níveis dos MQI e relacionados à dor neurogênica de origem pulpar; 3) correlacionar as características clínicas/radiográficas dos pacientes com os MO encontrados e com os níveis dos mediadores químicos da inflamação e da dor; 4) analisar, quando possível, a presença de Streptococcus mutans e Enterococcus faecalis através da técnica da cultura com meios específicos e sequenciamento genético. A amostra será constituída por 20 dentes com diagnóstico de PAI, distribuídos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a Substância Química Auxiliar (SQA) utilizada - clorexidina (CLX) gel 2% (n = 10) ou hipoclorito de sódio (NaOCl) 6% (n = 10) - durante o PQM. Além disso, serão realizadas coletas de dentes com polpa normal (grupo controle) cujo PQM também será realizado com CLX 2% (n=5) ou NaOCl 6% (n=5). Serão realizadas coletas antes do PQM utilizando lima Reciproc® (C1); após o PQM (C2); e após a MIC (C3) à base de hidróxido de cálcio. MO serão identificados e quantificados exclusivamente por método molecular (Nested-PCR e Checkerboard DNA-DNA hybridization) através de sondas específicas; cultura microbiana (UFC/mL) e por métodos moleculares derivados de amostras obtidas da cultura microbiana (Sequenciamento genético do gene 16S rRNA [BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing] e Next Generation Sequencing [NGS]). Os níveis dos MQI e relacionados à dor neurogênica, assim como os fatores de virulência dos MO (IL-1±, IL-1², TNF-± e substância P, LTA) serão dosados pelo ensaio imunoenzimático (Enzyme-Linked immunosorbent Assay - ELISA) e o LPS avaliado pelo método turbidimétrico LAL Pyrogent 5000. Os níveis de dor dos pacientes serão ainda mensurados qualitativamente através de escala visual e quantitativamente por meio do teste elétrico. Após o processamento das amostras, os dados serão tabulados e analisados estatisticamente pelo SPSS para Windows. (AU)