Ação do PPAR gama (Peroxisome Proliferator Activated Receptor gamma) e AMPK (AMP-activated protein kinase) sobre a expressão da IDE (Insulin Degrading Enzyme) em células beta pancreáticas

Resumo

A agregação da amilina ou IAPP (Islet Amyloid Polypeptide) em fibras proteicas poliméricas insolúveis (ou amiloide pancreático) está entre os fatores que levam à perda de massa de células beta pancreáticas verificada no Diabetes Mellitus do tipo 2 (DM2). A IDE (Insulin Degrading Enzyme) é a principal enzima responsável pela degradação de IAPP e estudos têm demonstrado que a expressão da IDE pode ser modulada por PPAR gama (Peroxisome Proliferator Activated Receptor gamma) e AMPK (AMP-Activated Protein Kinase) em células neurais, hepáticas e musculares. Entretanto, o efeito de PPAR gama e AMPK sobre a expressão da IDE, nas células beta pancreáticas, ainda não foi explorado. Dessa forma, investigaremos a função do PPAR gama e AMPK sobre a expressão da IDE utilizando seus agonistas, a rosiglitazona e a metformina, respectivamente. Para isso, células beta pancreáticas da linhagem INS-1E serão distribuídas nos grupos: Controle (CTL), grupo incubado com meio contendo os solventes dos fármacos; Rosiglitazona (RGZ) ou Metformina (MET), grupo incubado com meio contendo os fármacos; RGZ+ML345 e MET+ML345, grupos incubados com meio contendo os fármacos e o ML345, um potente inibidor da IDE. Serão analisadas a expressão gênica e proteica da IDE, degradação de IAPP, formação de amiloide pancreático, secreção de insulina e morte celular. Por fim, avaliaremos a reprodutibilidade dos resultados em linhagem de células bera (EndoC-betaH1) e ilhotas de humanos. Com este projeto, esperamos revelar novos mecanismos de ação de fármacos já utilizados no tratamento do DM2, contra a toxicidade do amiloide pancreático e instigar investigações de novos tratamentos para o DM2, visando a melhora do funcionamento da IDE nas células beta pancreáticas. (AU)