Diversidade de piroplasmídeos em mamíferos e aves selvagens no Brasil

Resumo

Piroplasmídeos são protozoários apicomplexos transmitidos por carrapatos que compreendem os gêneros Babesia, Rangelia, Cytauxzoon e Theileria. Há uma ampla diversidade de espécies que acometem diferentes táxons de mamíferos e aves, podendo causar enfermidades em animais e humanos. Estudos visando detectar piroplasmídeos na fauna brasileira, a qual mostra-se extremamente diversa, mostram que diferentes e novas espécies desses protozoários circulam no país. O presente estudo tem como objetivo investigar a ocorrência e determinar a diversidade genética de piroplasmídeos em diferentes grupos taxonômicos de vertebrados no Brasil. Para isto serão extraídas alíquotas de DNA de 1.557 amostras biológicas de animais de vida-livre pertencentes a sete grupos taxonômicos (311 Pilosa, 20 Cingulata, 367 Chiroptera, 188 Artiodactyla, 26 Carnivora, 129 Rodentia, oito Didelphimorphia e 500 Passeriformes) de diferentes estados do país (SP, MT, MS, PA, RO, AC, PR). As amostras biológicas serão submetidas a ensaios de PCR em tempo real e convencional baseados nos genes 18S rRNA, hsp-70, cox-1, cox-3, cytB, ²-tubulina, nas regiões intergênicas ITS-1 e ITS-2 e na região lsu5-lsu4 de piroplasmídeos. As amostras positivas serão purificadas e sequenciadas pelo método de Sanger. Amostras com picos múltiplos nos cromatogramas serão submetidas à clonagem gênica. O posicionamento filogenético das sequências obtidas será realizado por meio da construção de dendogramas. Por fim, o alinhamento das sequências será utilizado para calcular a diversidade de nucleotídeos e o nível de polimorfismos para a análise da diversidade genética dos agentes. A genealogia das sequências de nucleotídeos será realizada utilizando o programa Splitstree. O presente estudo contribuirá para a estudo da diversidade de piroplasmídeos entre a fauna selvagem brasileira.