Detecção e caracterização molecular de piroplasmídeos em preguiças nos estados do Pará e Rondônia

Resumo

Babesia spp. e Theileria spp. são protozoários apicomplexas (Piroplasmorida: Babesiidae/Theileriidae) que acometem diversas espécies de animais domésticos e selvagens, haja vista a ampla distribuição mundial de seus carrapatos vetores e alta proficiência de sua transmissão. Embora estudos venham investigando a ocorrência e diversidade genética de piroplasmas em animais selvagens no Brasil, poucos investigaram tais agentes em preguiças no Brasil. O presente estudo tem como objetivo investigar a ocorrência e caracterizar o DNA de Babesia/Theileria spp. em227 amostras de sangue de preguiças provenientes dos estados do Pará (n= 128) e Rondônia (n= 99), das seguintes espécies: 188 Bradypus variegatus, 3 Bradypussp., 5 Choloepus didactylus, 31 Choloepus sp. As amostras de sangue serão submetidas à extração de DNA e triagem por meio de neste PCR para Babesia/Theileria spp. spp. baseadas no gene 18S rRNA. As amostras positivas serão submetidas a ensaios de PCR convencional para os genes 18S rRNA (fragmento de 1500 pb), cox-1, cox-3, cytB e hsp70. Os amplicons serão purificados e sequenciadas pelo método de Sanger. As sequências obtidas serão submetidas a inferências filogenéticas para posicionamento das mesmas dentro de um parentesco evolutivo com espécies de piroplasmídeos detectadas no Brasil e outras partes do mundo. Por fim, o alinhamento das sequências será utilizado para calcular a diversidade de nucleotídeos e o nível de polimorfismos para a análise da diversidade genética. Em suma, o presente estudo contribuirá para o entendimento da diversidade genética e epidemiologia de piroplasmídeos em mamíferos da Superordem Xenarthra da fauna brasileira.