Anticorpos monoclonais quiméricos como estratégia de ativação de respostas imunológicas contra infecção pelo SARS-CoV 2

Resumo

O vírus SARS-CoV-2, agente causador da doença COVID-19, desencadeia um quadro respiratório agudo grave que leva ao óbito em aproximadamente 2% dos casos. O advento da pandemia propiciou o lançamento de novas plataformas tecnológicas voltadas para o desenvolvimento de vacinas eficazes e seguras, como as vacinas vetorizadas por adenovírus e as vacinas baseadas em mRNA. Neste contexto, estudos prévios demonstraram que imunizações baseadas no direcionamento de antígenos para células apresentadoras de antígenos (APC), como as células dendríticas (DCs), podem aumentar a eficácia vacinal. Buscando explorar essa abordagem, o presente projeto de pesquisa tem como objetivo a avaliação da eficácia de anticorpos monoclonais recombinantes fusionados ao domínio de ligação ao receptor (RBD) da proteína Spike do SARS-CoV-2, que direcionam o antígeno alvo para diferentes subpopulações de DCs. Para atingir esse objetivo, os anticorpos recombinantes (tanto de camundongos como de humanos) serão construídos, produzidos em sistema eucarioto e purificados por cromatografia de afinidade. Os anticorpos serão administrados pela via subcutânea em combinação com o adjuvante Poly (I:C) e testados em condições experimentais (camundongos C57BL/6). As respostas imunológicas induzidas, incluindo a produção de anticorpos específicos e a ativação de células T com potencial citotóxico, serão monitoradas nos animais imunizados. As respostas de anticorpos serão avaliadas pela dosagem de IgG sérica, incluindo subclasses de IgG, e a avaliação da capacidade de neutralização por meio de ensaios de neutralização viral in vitro (PRNT e VNT). Também serão medidas as respostas celulares RBD-específicas por meio de ensaios como ICS (intracellular cytokine staining), ELISPOT (enzyme-linked immunosorbent spot). A capacidade protetora das respostas imunológicas induzidas será avaliada por meio da infecção de camundongos transgênicos para expressão do receptor ECA-2 humano. Dessa forma, esperamos contribuir para o desenvolvimento de uma estratégia vacinal inovadora que auxilie no controle da pandemia contra o SARS-CoV-2 assim como para outras futuras infecções virais com potencial pandêmico.