Caracterização do fator de transcrição do tipo Zinc cluster: o papel na via de captação de aminoácidos em Cryptococcus neoformans e a sua relação com a virulência

Resumo

Infecções Fúngicas Invasivas (IFIs) são causadas por patógenos oportunistas como o fungo basidiomiceto Cryptococcus neoformans. Essas infecções acometem principalmente indivíduos imunocomprometidos, se disseminando por diversos sítios corpóreos, inclusive no sistema nervoso central causando meningite fúngica, uma doença de alta taxa de mortalidade. A criptococose é de difícil tratamento, pois os fármacos disponíveis no mercado possuem baixa toxicidade seletiva e inúmeros efeitos colaterais. Diversos estudos buscam conhecer a biologia dessa levedura, seus fatores de virulência, as suas interações com o hospedeiro e novas formas de tratamento. O grupo de Cryptococcus do Laboratório de Interações Microbianas da UNIFESP (LIMIc) demonstrou que as permeases de aminoácidos são essenciais para a sobrevivência e virulência de C. neoformans. A expressão destes transportadores está, em parte, sob o controle da via de sinalização de Ras1. A deleção de Ras1 reduziu a transcrição de vários genes que codificam as permeases de aminoácidos em C. neoformans, porém o mecanismo por trás disso não foi esclarecido. Em S. cerevisiae, a proteína Msi1é atenuadora da sinalização de Ras/cAMP. O dados da literatura, demonstram que em C. neoformans MSL1 tem efeitos pleiotrópicos na produção de melanina, diferenciação sexual, termotolerância, resposta ao estresse e resistência aos antifúngicos. Os nossos estudos anteriores demonstraram que Msl1 atua como regulador negativo de Ras em resposta aos aminoácidos, pois a expressão dos genes de permeases foi induzida na linhagem ”msl1 em relação ao selvagem. Além disso, Msl1 faz parte do complexo polycomb de silenciamento de genes subteloméricos. Dados da literatura e nossos próprios dados demonstraram que Msl1 regula negativamente a expressão de um gene subtelomérico que codifica um fator de transcrição do tipo Zinc cluster (CNAG_05333) ainda não descrito em basidiomicetos. Nossas análises de transcriptoma indicam que este fator de transcrição é induzido em mutantes nutricionais. Portanto este trabalho de mestrado tem como objetivo testar a hipótese de que o atenuador negativo de Ras1 (Msl1) controla a expressão do fator de transcrição Zinc cluster CNAG_05333, o qual por sua vez controla a expressão das permeases de aminoácidos. Ainda, de maneira mais ampla este projeto de pesquisa vai procurar estabelecer a função deste fator de transcrição Zinc cluster na resposta ao estresse nutricional e na virulência de C. neoformans.