Inibidor de cisteíno proteases derivado da cana-de-açúcar: efeito na diferenciação osteoblástica e odontoblástica de células pulpares humanas

Resumo

As catepsinas, um grupo de cisteíno proteases, apresentam importante papel em alguns processos patológicos. Sabe-se que um aumento da atividade das mesmas, principalmente da catepsina K, está relacionado ao desenvolvimento de doenças, como osteoporose e periodontite apical, por participarem do processo de reabsorção óssea. As cistatinas são inibidores naturais e reversíveis de cisteíno proteases. As cistatinas inibidoras de catepsina K constituem uma classe emergente de fármacos que são antagonistas potentes da atividade osteoclástica, reduzindo a perda óssea. Além da inibição de catepsina K, alguns estudos têm mostrado que as cistatinas podem apresentar efeito pró-osteogênico. As fitocistatinas são cistatinas de plantas, e algumas delas já foram produzidas de forma recombinante, como a CaneCPI-5 derivada da cana-de-açúcar. Além de já terem sido evidenciados seu efeito anti-inflamatório e sua capacidade de inibir catepsinas humanas, estudo preliminar do nosso grupo de pesquisa, mostrou em pré-osteoblastos (MC3T3), que ela apresenta potencial pró-osteogênico. O objetivo deste estudo será avaliar o efeito da CaneCPI-5, em contato com blocos de dentina, sobre as células pulpares humanas (hDPCs). Serão empregadas diferentes abordagens metodológicas como ensaios de viabilidade, adesão, espalhamento e diferenciação em fenótipo mineralizador das hDPCs. Adicionalmente, serão realizados ensaios buscando conhecer o envolvimento da via BMP/SMAD na diferenciação osteogênica e/ou odontogênica das hDPCs estimulada pela CaneCPI-5 empregando testes de reação da polimerase em cadeia em tempo real quantitativo (RT-qPCR) e Western Blot. Caso os resultados sejam promissores, a CaneCPI-5 poderá se constituir em uma molécula com potencial para aplicações biotecnológicas, como em técnicas de tratamento que objetivem reparo do complexo dentino-pulpar e/ou periapical, incluindo as técnicas de regeneração endodôntica.