Modelagem da matriz extracelular e da transição epitelial-mesenquimal por gradiente histomolecular em neoplasia neuroendócrina pulmonar para decisões clínicas

Resumo

Introdução: Estudos prévios têm descrito, através da análise genômica no tecido tumoral, a busca pela aplicação de biomarcadores associados à progressão metastática e à morte por câncer, principalmente, baseados em observações do comportamento de tumores primários. No entanto, os estudos não priorizam a pesquisa de biomarcadores capazes de identificar os efeitos da fibrose associada ao estroma, no tumor, e que pode ser terapeuticamente relevante no caso de lesões metastáticas. As neoplasias pulmonares neuroendócrinas (PNENs) são classificadas em quatro grupos distintos: os tumores carcinoides atípico (CA) e típico (CT), os carcinomas neuroendócrinos de grandes células (CNEGC) e os carcinomas pulmonares de pequenas células (CPPC). O comportamento desses tumores é muito diverso, enquanto os tumores carcinoides tendem a serem menos agressivos, os CNEGC e os CPPC apresentam-se, frequentemente, metastáticos no momento do diagnóstico e com pior prognóstico para o paciente. Os mecanismos moleculares que levam às metástases de PNENs permanecem amplamente desconhecidos e requerem estudos mais aprofundados. Contudo, a identificação de genes fibróticos em tumores primários e seus efeitos no microambiente tumoral (TME) como novos biomarcadores e alvos terapêuticos para PNENs parece ser promissora. Uma vez que os PNENs se originam das células neuroectodérmicas, fatores responsáveis pela ativação da transição epitelial para mesenquimal (EMT) despontam como possíveis biomarcadores envolvidos na transformação genotípica dessas células neuroectodérmicas levando à modificação no fenótipo celular final. Neste cenário, as pesquisas de marcadores adicionais, também aplicáveis a espécimes de biópsia, que correlacionem os subtipos de PNENs com a resposta ao tratamento sistêmico, são imprescindíveis, e os potenciais candidatos atuais são os genes EMT neurogênicos. Objetivos: No presente estudo, através de uma coorte de pacientes diagnosticados com PNENs pretendemos avaliar perfis de expressão de proteínas fibróticas, que estão envolvidas na matriz extracelular (MEC) como, (TGF-²1, COL1A2, COL3A1, COL5A2, ITGA5, ITGAV e ITGB1) e de proteínas relacionadas a EMT, incluindo (BMP1, BMP7, CALD1, CDH1, EGFR, ERBB3, PLEK2, SNAI2, STEAP1, TCF4, CDH2, KRT14, CAV2, DSC2 e IL1RN) para elucidar como o envolvimento dessas proteínas podem facilitar o mecanismo de invasão e de metástase em PNENs. Materiais e Métodos: As amostras tumorais de uma coorte de pacientes brasileiros diagnosticados com tumores pulmonares primários - PNENs (carcinoides atípicos e típicos, n=100; carcinoma neuroendócrino de grandes células e carcinoma pulmonar de células pequenas, n=100), oriundas do Instituto do Câncer do Estado de São Paulo (ICESP), do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HC-FMUSP) e do Instituto do Coração (Incor) serão submetidas à investigação de proteínas fibróticas da MEC e de expressão de proteínas relacionadas à EMT, avaliadas por meio de ensaios in situ. Esses ensaios consistem em imuno-histoquímica, imunofluorescência e quantificação semi-automatizada. Além disso, para avaliar o matrissoma da MEC, usaremos a coloração do pentacromo de Movat. Assim, a expressão das proteínas da MEC e da EMT será correlacionada com os parâmetros clínico-patológicos e implicações prognósticas usando os testes estatísticos relevantes. Conclusão: Os padrões diferenciais das proteínas da MEC e da EMT que foram encontrados em diferentes subtipos histológicos de PNENs podem alavancar os estudos sobre o papel dessas proteínas no processo metastático e no comportamento distinto desses tumores. Além disso, demostramos que as proteínas da EMT e da MEC mantêm uma forte influência sobre as células cancerígenas neuroendócrinas, permeando a invasão e permitindo a metástase com implicações na sobrevida do paciente. (AU)