Efeitos do cádmio sobre pré-adipócitos humanos

Resumo

Para além das disfunções do tecido adiposo (TA) geradas pelo excesso de lipídeos, a literaturatem demonstrado que o TA é alvo da toxicidade de alguns metais. De modo mais específico, o cádmiotem ganhado atenção considerável devido ao seu papel crítico no desenvolvimento de algunsdistúrbios metabólicos-endócrinos, favorecendo o desenvolvimento de doenças cardiovasculares ediabetes mellitus. Durante a adipogênese, processo de diferenciação das células tronco mesenquimais(adipose stem cells -ASCs) em adipócitos, alterações epigenéticas envolvendo a lisina 27 da histona3 (H3K27) são críticas para o silenciamento e para a ativação de fatores de transcrição responsáveispelo comprometimento das ASCs. Ezh2 é responsável pela trimetilação da H3K27 e ao silenciamentogênico, enquanto Crebbp e Ep300 (Cbp/p300) são responsáveis pela acetilação, que leva a ativaçãoda transcrição. Entre o silenciamento e a ativação é necessário a ação das demetilases Kdm6a eKdm6b. Este trabalho tem como objetivo investigar os efeitos do metal pesado cádmio sobremodificações epigenéticas em ASCs humanas. Para tanto, ASCs presentes na fração do estromavascular (EV) do TA visceral e/ou subcutaneo coletado de pacientes durante cirurgias eletivas, serãocultivadas e expostas in vitro ao cádmio (3 e 10 µM), por 24 e 48 horas. Em seguida, serão utilizadaspara experimentos que empregam métodos de RT-PCR em tempo real para avaliação de alterações demarcas epigenéticas em pré-adipócitos, mediante a expressão dos transcritos que codificam osmodificadoras de H3K27: H3K27me3, H3K27ac, Crebbp, Ep300, Kdm6A, Kdm6b.