Diversidade de amebas de vida livre no Rio Monjolinho no estado de São Paulo - abordagens morfológicas e moleculares

• Processo: 18/20693-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOTA - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2022
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Otavio Henrique Thiemann
• Beneficiário: Otavio Henrique Thiemann
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Douglas Cedrim Oliveira ; Jacob Lorenzo-Morales ; María Reyes Batlle ; Odete Rocha
• Assunto(s): Saúde pública Filogenia Biodiversidade Amoeba Trofozoítos Análise morfológica Análise molecular Encefalite Rio Monjolinho
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Amoebas de vida livre | biodiversidade microbiana | Filogenia | Fla | Free-living Amoeba | Phylogeny | Amoebas de vida livre

Resumo

Amebas de vida livre (AVL) são protistas de ampla distribuição ambiental, desde amostras de água doce a amostras de solo. Os gêneros Naegleria, Acanthamoeba, Sappinia e Balamuthia atribuem destaque ao grupo devido às encefalites causadas em seres humanos, normalmente relatadas pós mortem, uma vez que as doenças frequentemente são fatais. O conhecimento sobre a biodiversidade das AVL em geral e a incidência dos gêneros patogênicos no Brasil são ainda pouco elucidados. Neste sentido, esta pesquisa objetiva identificar a ocorrência ambiental de AVL em cinco sítios de coleta no Rio Monjolinho, São Carlos - São Paulo, Brasil. A metodologia adotada inclui a caracterização liminológica da água e análises morfológicas e moleculares das amebas encontradas. Após o cultivo e isolamento dos trofozoitos serão realizadas microscopia óptica utilizando quatro métodos de coloração e microscopia eletrônica de varredura. A identificação morfológica das espécies será feita utilizando o guia de classificação PAGE via elaboração de uma ferramenta de visualização do mesmo. A abordagem molecular inclui um conjunto de primers para amplificar a região 18S rDNA do grande grupo AVL, bem como por identificações gênero-específicas, seguidos por sequenciamento Sanger. Por sua vez, o DNA extraído diretamente das amostras ambientais será sequenciado em uma plataforma Illumina HiSeq. Testes piloto para validação da metodologia proposta revelaram seu potencial no isolamento de amebas desde o processo de coleta de água, cultivo dos trofozoitos e reações de PCR. Este projeto busca o adequamento ao programa BIOTA-FAPESP por investigar a biodiversidade de AVL em um rio paulista com potencial para contribuição na saúde pública, se detectadas espécies patogênicas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BELLINI, NATALIA KARLA; MOREIRA DA FONSECA, ANA LETICIA; REYES-BATLLE, MARIA; LORENZO-MORALES, JACOB; ROCHA, ODETE; THIEMANN, OTAVIO HENRIQUE. Isolation of Naegleria spp. from a Brazilian Water Source. PATHOGENS, v. 9, n. 2, FEB 2020. (18/20693-4)

BELLINI, NATALIA KARLA; THIEMANN, OTAVIO HENRIQUE; REYES-BATLLE, MARIA; LORENZO-MORALES, JACOB; COSTA, ADRIANA OLIVEIRA. A history of over 40 years of potentially pathogenic free-living amoeba studies in Brazil - a systematic review. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 117, p. 16-pg., 2022-01-01. (18/20693-4)