Desenvolvimento de um kit de PCR com hot-start, 100% nacional para acelerar a pesquisa científica

• Processo: 19/09113-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Pesquisa Inovativa em Pequenas Empresas - PIPE
• Vigência: 01 de fevereiro de 2020 - 31 de dezembro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Bruna Tatsue Grichoswski Nakagawa
• Beneficiário: Bruna Tatsue Grichoswski Nakagawa
• Empresa Sede: Ecra Biotec Serviços e Pesquisas Ltda
• CNAE: Serviços combinados de escritório e apoio administrativo
• Município: Santo André
• Pesquisadores associados: Fabio Trigo Raya ; Robson Tramontina
• Bolsa(s) vinculada(s): 20/06377-2 - Desenvolvimento de um kit de PCR com hot-start, 100% nacional para acelerar a pesquisa científica, BP.PIPE
• Assunto(s): Reação em cadeia por polimerase (PCR) Desenvolvimento de produtos Pesquisa científica DNA polimerase dirigida por DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: aceleração pesquisa | high fidelity | hot start | Pcr | produto nacional | Biologia Molecular

Resumo

A pesquisa ciêntífica no âmbito dos diagósticos moleculares desenvolvida nos laboratórios do Ministérios da Saúde (Instituto Evandro Chagas, Lacen, Fundação Oswaldo Cruz entre outros), laboratórios privados, bem como em todos os centros de pesquisa e universidades, é intrínsicamente dependente da disponibilidade de enzimas de DNA polimerase. A DNA polimerase, permite a replicação in vitro da molécula de DNA e depende de condições adequadas de atuação. A temperatura é um fator que influencia a atividade desta enzima, sendo que esta consegue polimerisar a elevadas temperaturas, mas também a temperaturas mais baixas (abaixo de 50 ºC). Esse motivo potenciou o desenvolvimento de DNA polimerases hot start, cujo sítio ativo fica inibido à temperatura ambiente por ação de moléculas adicionais como anticorpos, aptâmeros, nano partículas, entre outros. Quando submetidas à temperatura ótima de PCR, o elemento inibitório é removido e a sua atuação procede naturalmente. Quando esta enzima é importada o seu preço é altamente inflacionado e os tempos de entrega demorados, o que limita consequentemente, o desenvolvimento de novos produtos e o avanço da pesquisa. Isto é extremamente grave no contexto brasileiro quando nos referimos ao desenvolvimento de kits para detecção precoce de doenças como zika ou dengue. O projeto apresentado pela empresa ECRA BIOTEC SERVIÇOS E PESQUISAS LTDA (de agora em diante designada ECRABIOTEC), se propõe a desenvolver um kit de DNA polimerase high fidelity com hot start, fundamental para realização de ensaios de detecção das doenças anteriormente mencionadas ou em pesquisa científica nas mais variadas áreas. O produto é 100% nacional, o que irá ter uma influência positiva no preço final, bem como na diminuição do tempo de entrega podendo assim acelerar a pesquisa nacional. O projeto aqui exposto apresenta alguns resultados preliminares obtidos pelos esforços conjuntos dos colaboradores participantes neste projeto. A equipe associada desenvolveu até ao momento da submissão ao PIPE fase 1, uma enzima DNA polimerase high fidelity, que foi distribuída a 10 pesquisadores de universidades públicas e centros de pesquisa, que relataram resultados positivos após a utilização da enzima. O interesse demonstrado pelos pesquisadores levou a equipe a se propor a testar a viabilidade técnica de desenvolver uma versão dessa enzima, com hot start. Irão ser testadas duas alternativas de hot start, sendo que uma usa aptâmeros (oligonucleotidos que se unem à DNA polimerase inibindo-a de forma reversível) e a outra que usa binding proteins, que também inibem a atividade da DNA polimerase de forma reversível. Pretende-se posteriormente, levar para a fase 2 do PIPE, aquela que apresentar melhor viabilidade técnico-econômica. Os esforços da equipe atraíram a atenção de empresários do sector, que contam com mais de 3 anos de expertise em representação comercial técnica de produtos para a indústria farmacêutica como drug delivery systems e de cadeia fria como data loggers. A parceria levou à criação da ECRABIOTEC. A submissão deste projeto PIPE, tem como objetivo alavancar uma nova empresa na área da biotecnologia, potenciando o rápido desenvolvimento dos kits de DNA polimerase e acelerando a pesquisa nacional. (AU)