| Processo: | 20/00126-8 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de julho de 2020 |
| Data de Término da vigência: | 30 de junho de 2023 |
| Área do conhecimento: | Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica |
| Pesquisador responsável: | Maria Eugênia Queiroz Nassur |
| Beneficiário: | Maria Eugênia Queiroz Nassur |
| Instituição Sede: | Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | Ribeirão Preto |
| Pesquisadores associados: | José Alexandre de Souza Crippa ; Vitor Tumas |
| Assunto(s): | Doenças neurodegenerativas Doença de Parkinson Doença de Alzheimer Cromatografia líquida de alta eficiência Biomarcadores Processos de separação Bancos de espécimes biológicos |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | amostras biológicas | biomarcadores | Doenças Neurodegenerativas | fiber-in-tube SPME-LC-MS | in-tube SPME-LC-MS | Ms | Salle | Métodos de Separação |
Resumo
O diagnóstico conclusivo das doenças neurodegenerativas, como a doença Parkinson (DP) e a doença Alzheimer (DA), tem sido eminentemente clínico e, nesses casos, a neurodegeneração já se instalou no cérebro do paciente. Portanto, esforços têm sido realizados para encontrar um biomarcador molecular para a identificação de pacientes em risco de desenvolver estas doenças, bem como para o diagnóstico precoce e acompanhamento da progressão destas neurodegenerações. A cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) tem sido considerada a técnica analítica de referência para a determinação de biomarcadores em fluidos biológicos. Em razão da complexidade dos fluidos biológicos, os métodos LC-MS/MS requerem a etapa de preparo de amostras para a eliminação das macromoléculas da matriz biológica e concentração dos analitos (níveis de traços). As técnicas de preparo de amostras biológicas têm sido simplificadas, miniaturizadas (menor volume de amostra e de consumo de solvente orgânico) e/ou hifenizadas com sistemas cromatográficos, automação (high-throughput performance). Neste contexto, podemos destacar a microextração líquido-líquido assistida por salting-out, (micro SALLE) e a microextração em fase sólida no capilar (in-tube SPME) hifenada à LC-MS/MS. O desenvolvimento de capilares com fases estacionárias inovadoras bifuncionais para a técnica in-tube SPME, como as fases monolíticas orgânicas com materiais de acesso restrito (RAM) e líquidos iônicos polimerizáveis (PIL) zwiteriônicos, tem permitido a pré-concentração seletiva dos analitos. Neste projeto, para a avaliação dos potenciais biomarcadores da DA, os seguintes métodos serão desenvolvidos para análises de amostras de plasma e de líquido cefalorraquidiano: (a) in-tube SPME-LC-MS/MS com capilar com fase monolítica orgânica com grupos sulfônicos e revestimento RAM para a determinação de peptídeos ²-amilóides, (b) in-tube SPME-MS/MS com capilar de poliéter(éter)cetona (PEEK) recheado com fibras de nitinol (suporte SPME de última geração) recobertas quimicamente com fase estacionária de líquidos iônicos poliméricos zwiteriônico (ZILs) para a determinação de peptídeos ²-amilóides e (c) in-tube SPME-LC-MS/MS com capilar com fase monolítica orgânica com grupos trocadores de cátions e revestimento RAM para a determinação de homocisteína e ácido homocisteico. Já para a avaliação dos potenciais biomarcadores da DP, o método micro SALLE/LC-MS/MS será desenvolvido para a determinação de anandamida (AEA) e 2-araquidonoilglicerol (2-AG) em encéfalos de ratos induzidos ao parkinsonismo, tratados ou não com L-Dopa. Portanto, em congruência ao estado da arte das técnicas miniaturizadas de extração e de separação, este projeto terá grande valia na área de neurociências. (AU)
| Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre o auxílio: |
| Mais itensMenos itens |
| TITULO |
| Matéria(s) publicada(s) em Outras Mídias ( ): |
| Mais itensMenos itens |
| VEICULO: TITULO (DATA) |
| VEICULO: TITULO (DATA) |