Auxílio à pesquisa 20/00126-8 - Doenças neurodegenerativas, Doença de Parkinson - BV FAPESP
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Desenvolvimento de métodos de microextração hifenados à LC-MS/MS ou diretamente à MS/MS para a determinação de biomarcadores em amostras biológicas de pacientes ou de ratos com doenças neurodegenerativas

Processo: 20/00126-8
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
Pesquisador responsável:Maria Eugênia Queiroz Nassur
Beneficiário:Maria Eugênia Queiroz Nassur
Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Pesquisadores associados:José Alexandre de Souza Crippa ; Vitor Tumas
Assunto(s):Doenças neurodegenerativas  Doença de Parkinson  Doença de Alzheimer  Cromatografia líquida de alta eficiência  Biomarcadores  Processos de separação  Bancos de espécimes biológicos 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:amostras biológicas | biomarcadores | Doenças Neurodegenerativas | fiber-in-tube SPME-LC-MS | in-tube SPME-LC-MS | Ms | Salle | Métodos de Separação

Resumo

O diagnóstico conclusivo das doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson (DP) e a doença de Alzheimer (DA), tem sido eminentemente clínico e, nesses casos, a neurodegeneração já se instalou no cérebro do paciente. Portanto, esforços têm sido realizados para encontrar um biomarcador molecular para a identificação de pacientes em risco de desenvolver estas doenças, bem como para o diagnóstico precoce e acompanhamento da progressão destas neurodegenerações. A cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) tem sido considerada a técnica analítica de referência para a determinação de biomarcadores em fluidos biológicos. Em razão da complexidade dos fluidos biológicos, os métodos LC-MS/MS requerem a etapa de preparo de amostras para a eliminação das macromoléculas da matriz biológica e concentração dos analitos (níveis de traços). As técnicas de preparo de amostras biológicas têm sido simplificadas, miniaturizadas (menor volume de amostra e de consumo de solvente orgânico) e/ou hifenizadas com sistemas cromatográficos, automação (high-throughput performance). Neste contexto, podemos destacar a microextração líquido-líquido assistida por salting-out, (micro SALLE) e a microextração em fase sólida no capilar (in-tube SPME) hifenada à LC-MS/MS. O desenvolvimento de capilares com fases estacionárias inovadoras bifuncionais para a técnica in-tube SPME, como as fases monolíticas orgânicas com materiais de acesso restrito (RAM) e líquidos iônicos polimerizáveis (PIL) zwiteriônicos, tem permitido a pré-concentração seletiva dos analitos. Neste projeto, para a avaliação dos potenciais biomarcadores da DA, os seguintes métodos serão desenvolvidos para análises de amostras de plasma e de líquido cefalorraquidiano: (a) in-tube SPME-LC-MS/MS com capilar com fase monolítica orgânica com grupos sulfônicos e revestimento RAM para a determinação de peptídeos ²-amilóides, (b) in-tube SPME-MS/MS com capilar de poliéter(éter)cetona (PEEK) recheado com fibras de nitinol (suporte SPME de última geração) recobertas quimicamente com fase estacionária de líquidos iônicos poliméricos zwiteriônico (ZILs) para a determinação de peptídeos ²-amilóides e (c) in-tube SPME-LC-MS/MS com capilar com fase monolítica orgânica com grupos trocadores de cátions e revestimento RAM para a determinação de homocisteína e ácido homocisteico. Já para a avaliação dos potenciais biomarcadores da DP, o método micro SALLE/LC-MS/MS será desenvolvido para a determinação de anandamida (AEA) e 2-araquidonoilglicerol (2-AG) em encéfalos de ratos induzidos ao parkinsonismo, tratados ou não com L-Dopa. Portanto, em congruência ao estado da arte das técnicas miniaturizadas de extração e de separação, este projeto terá grande valia na área de neurociências. (AU)

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Publicações científicas (16)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
GRECCO, CAROLINE F.; CREVELIN, EDUARDO JOSE; TUMAS, VITOR; HALLAK, JAIME EDUARDO C.; QUEIROZ, MARIA EUGENIA C.. Disposable Pipette Extraction Followed by Direct MS/MS Analysis of Beta Amyloid Peptides (A β 38, A β 40, and A β 42) in Cerebrospinal Fluid Samples. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 36, n. 1, p. 10-pg., . (20/00126-8, 19/04386-7)
CAROLINE F. GRECCO; EDUARDO JOSÉ CREVELIN; VITOR TUMAS; JAIME EDUARDO C. HALLAK; MARIA EUGÊNIA C. QUEIROZ. Disposable Pipette Extraction Followed by Direct MS/MS Analysis of Beta Amyloid Peptides (Aß38, Aß40, and Aβ42) in Cerebrospinal Fluid Samples. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 36, n. 1, . (17/02147-0, 20/00126-8, 19/04386-7)
DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; LANCAS, FERNANDO M.; HALLAK, JAIME E. CECILIO; QUEIROZ, MARIA E. COSTA. Fiber-in-tube SPME-CapLC-MS/MS method to determine A β peptides in cerebrospinal fluid obtained from Alzheimer ' s patients. Journal of Chromatography A, v. 1723, p. 7-pg., . (20/00126-8, 17/21984-0, 17/21985-6, 19/19485-0, 17/02147-0)
GRECCO, CAROLINE FERNANDES; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; OLIVEIRA, IGOR GUSTAVO CARVALHO; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. In-Tube Solid-Phase Microextraction Directly Coupled to Mass Spectrometric Systems: A Review. SEPARATIONS, v. 9, n. 12, p. 19-pg., . (17/02147-0, 19/19485-0, 20/00126-8, 20/06526-8, 19/04386-7)
GRECCO, CAROLINE FERNANDES; TUMAS, VITOR; HALLAK, JAIME EDUARDO CECILIO; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. In-tube solid-phase microextraction (sulfopropyl methacrylate-co-ethylene glycol dimethacrylate monolithic capillary) coupled to LC-MS/MS to determine beta amyloid peptides in Alzheimer's cerebrospinal fluid samples. SEPARATION SCIENCE PLUS, v. N/A, p. 12-pg., . (17/02147-0, 20/00126-8, 19/04386-7)
DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. Advances in sample preparation and HPLC-MS/MS methods for determining amyloid-beta peptide in biological samples: a review. ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY, v. 415, n. 18, p. 19-pg., . (17/02147-0, 19/19485-0, 20/00126-8)
PINTO, MANIA A. L.; DE SOUZA, ISRAEL D.; MIRANDA, LUIS FELIPPE C.; QUEIROZ, MARIA EUGENIA C.. A New Molecularly Imprinted Polymer for In-Tube SPME/UHPLC-MS/MS of Anandamide in Plasma Samples. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. N/A, p. 9-pg., . (13/03808-9, 15/07619-1, 17/02147-0, 20/00126-8, 19/19485-0)
GRECCO, CAROLINE FERNANDES; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. Novel materials as capillary coatings for in-tube solid-phase microextraction for bioanalysis. JOURNAL OF SEPARATION SCIENCE, v. 44, n. 8, p. 1662-1693, . (17/02147-0, 20/00126-8, 19/04386-7, 19/19485-0)
CARVALHO OLIVEIRA, IGOR GUSTAVO; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; DO NASCIMENTO, GLAUCE CRIVELARO; DEL BEL, ELAINE; COSTA QUEIROZ, MARIA EUGENIA. In-tube solid-phase microextraction directly coupled to tandem mass spectrometry for anandamide and 2-arachidonoylglycerol determination in rat brain samples from an animal model of Parkinson's disease. Journal of Chromatography A, v. 1636, . (19/19485-0, 18/06068-0, 20/00126-8, 14/50891-1)
CRUZ, JONAS CARNEIRO; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; LANCAS, FERNANDO MAURO; COSTA QUEIROZ, MARIA EUGENIA. Current advances and applications of online sample preparation techniques for miniaturized liquid chromatography systems. Journal of Chromatography A, v. 1668, p. 16-pg., . (19/19485-0, 17/02147-0, 20/00126-8)
COSTA QUEIROZ, MARIA EUGENIA; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; DE OLIVEIRA, IGOR GUSTAVO; GRECCO, CAROLINE FERNANDES. In vivo solid phase microextraction for bioanalysis. TRAC-TRENDS IN ANALYTICAL CHEMISTRY, v. 153, p. 18-pg., . (20/06526-8, 17/02147-0, 19/04386-7, 19/19485-0, 20/00126-8)
SOUZA, ISRAEL D.; OLIVEIRA, IGOR G. C.; QUEIROZ, MARIA EUGENIA C.. Innovative extraction materials for fiber-in-tube solid phase microextraction: A review. Analytica Chimica Acta, v. 1165, . (20/00126-8, 18/06068-0, 17/02147-0, 19/19485-0)
CRUZ, JONAS CARNEIRO; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; GRECCO, CAROLINE FERNANDES; FIGUEIREDO, EDUARDO COSTA; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. Recent advances in column switching high-performance liquid chromatography for bioanalysis. SUSTAINABLE CHEMISTRY AND PHARMACY, v. 21, . (19/19485-0, 19/04386-7, 20/00126-8, 17/02147-0)

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