Implicações do glifosato e do 2,4-D sobre a doença hepática gordurosa não alcoólica in vivo: análise do transcriptoma e da microbiota

• Processo: 20/01078-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2020
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Luís Fernando Barbisan
• Beneficiário: Luís Fernando Barbisan
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Bruno Cogliati ; Mathieu Frederick Alexander Vinken
• Assunto(s): Hepatopatia gordurosa não alcoólica Camundongos Glifosato Herbicidas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Camundongos | Doença Gordurosa Não Alcoólica do Fígado | Esteatohepatite Não alcoólica | glifosato | Herbicidas | 2 | 4-D | Patologia Toxicológica

Resumo

Considerada uma doença contemporânea, a doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) atingem cerca de 25% da população mundial. A DHGNA é uma doença multifatorial associada a hábitos alimentares, obesidade, sedentarismo e desordens metabólicas, envolvendo alterações moleculares e o crosstalk entre fígado, o tecido adiposo (TA) e a microbiota intestinal. Em estudos pré-clínicos, os herbicidas glifosato ou 2,4-D já demonstraram efeitos oxidantes, lipogênicos e/ou inflamatórios hepáticos, mesmo em intervenções abaixo dos limites toxicológicos vigentes. Essas moléculas são muito utilizadas na agricultura e, frequentemente, identificadas em alimentos e na água. Assim, será avaliado se o glifosato e 2,4D, isoladamente ou em combinação, promovem a DHGNA in vivo. A DHGNA será induzida em camundongos machos C57Bl/6J (n=10/grupo), fornecendo-se dieta hiperlipídica (20% de banha de porco), rica em sacarose (20%) e solução de açúcares (23,1 g/L de frutose; 18,9 g/L de glicose) por 6 meses. Simultaneamente, os animais receberão glifosato (0,05, 5 ou 50 mg/kg/dia), 2,4-D (0,02, 2 ou 20 mg/kg p.c./dia) ou a combinação de ambos (0,05+0,02; 5+2 ou 50+20 mg/kg/dia) por via intragástrica (5 vezes/semana). As doses foram baseadas nos valores de Ingestão Diária Aceitável (IDAs) ou No Observed Adverse Effect Level (NOAEL). Será calculada a curva glicêmica e o soro será obtido para análises bioquímicas (ALT, triglicérides e colesterol). Amostras hepáticas serão obtidas para análises histológicas (grau de DHGNA, fibrose e imunoistoquímica para Ki-67, caspase-3 clivada, CD68 e alfa-SMA), bioquímicas (determinação de glifosato e 2,4-D, ELISA para TNF-alfa e IL-6, perfil antioxidante e de AG) e moleculares (mRNA-seq). O TA, para análises histológicas (morfometria, mastócitos, imunoistoquímica para CD68), bioquímicas (ELISA para TNF-alfa e IL-6) e moleculares (mRNA-seq). O intestino delgado, para imunoistoquímica (ZO-1 e ocludina), já o conteúdo cecal, para análise da microbiota (rRNA 16S). Este trabalho pode contribuir para a reavaliação dos limites toxicológicos vigentes na condição de DHGNA. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BACIL, GABRIEL P.; COGLIATI, BRUNO; CARDOSO, DANIEL R.; BARBISAN, LUIS FERNANDO; ROMUALDO, GUILHERME R.. Are isothiocyanates and polyphenols from Brassicaceae vegetables emerging as preventive/therapeutic strategies for NAFLD? The landscape of recent preclinical findings. FOOD & FUNCTION, v. 13, n. 16, p. 15-pg., 2022-07-20. (20/01944-6, 20/00377-0, 20/01078-7)

ROMUALDO, GUILHERME R.; VALENTE, LETICIA CARDOSO; SPROCATTI, ANA CAROLINA; BACIL, GABRIEL PRATA; DE SOUZA, ISADORA PENEDO; RODRIGUES, JOSIAS; RODRIGUES, MARIA APARECIDA MARCHESAN; VINKEN, MATHIEU; COGLIATI, BRUNO; BARBISAN, LUIS FERNANDO. Western diet-induced mouse model of non-alcoholic fatty liver disease associated with metabolic outcomes: Features of gut microbiome-liver-adipose tissue axis. NUTRITION, v. 103-104, p. 12-pg., 2022-10-03. (21/07954-6, 20/00377-0, 20/01078-7)

RIBEIRO, GUILHERME; SOUZA, JESSICA LURI HISANO DE; VALENTE, LETICIA CARDOSO; BARBISAN, LUIS FERNANDO. Assessment of the impact of glyphosate and 2,4-D herbicides on the kidney injury and transcriptome changes in obese mice fed a Western diet. Toxicology Letters, v. 385, p. 11-pg., 2023-08-15. (20/01078-7, 20/00377-0)