Prototipagem e validação de kit ELISA com antígeno recombinante Lb6H para o diagnóstico sorológico da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA)

• Processo: 21/12535-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2025
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Maria Carmen Arroyo Sanchez
• Beneficiário: Maria Carmen Arroyo Sanchez
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Hiro Goto ; José Angelo Lauletta Lindoso
• Assunto(s): Leishmaniose cutânea Protótipo Técnicas e procedimentos diagnósticos Proteínas recombinantes Ensaio de imunoadsorção enzimática Resposta imune
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antígeno recombinante | diagnóstico | Elisa | leishmaniose tegumentar | protótipo | Diagnóstico

Resumo

O diagnóstico da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma questão em aberto em nosso meio, sendo premente a busca de uma solução. Exames laboratoriais são importantes no diagnóstico de LTA, pois as manifestações clínicas, embora muitas vezes sugestivas, não são patognomônicas, havendo necessidade de diagnóstico diferencial. Dos exames laboratoriais, os voltados ao encontro de parasitos em amostras provenientes de lesão são considerados padrão ouro, mas a sensibilidade não é alta; os testes moleculares voltados à detecção de DNA de Leishmania carecem ainda de padronização entre os vários laboratórios. Neste cenário, surge a opção de exames laboratoriais indiretos que detectam a presença de resposta imune à Leishmania, exame sorológico ou teste de hipersensibilidade tardia. Entretanto, o teste de Montenegro (hipersensibilidade tardia), que era utilizado na rotina clínica, não é mais realizado por descontinuidade na produção do antígeno, trazendo problemas ao diagnóstico de LTA. Em estudo recente, nosso grupo avaliou ELISA com antígeno recombinante (r) Lb6H derivado da sequência de Leishmania (Viannia) braziliensis, que mostrou um desempenho excelente, com sensibilidade de 100,0% e especificidade de 98,5% para o diagnóstico dessa condição patológica. Com esses resultados e devido à ausência de consenso em relação à sorologia de LTA, vislumbramos a possibilidade da utilização de rLb6H no diagnóstico dessa leishmaniose. Neste projeto, validaremos teste sorológico, no formato ELISA, utilizando antígeno rLb6H e seguiremos com o desenvolvimento de protótipo de um kit de ELISA-rLb6H para complementar o diagnóstico da LTA. A importância deste projeto é evidente, pois virá suprir, ao ser validado e desenvolvido teste ELISA, a lacuna da inexistência de um teste diagnóstico complementar para a LTA. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

VALENCIA-PORTILLO, RUTH TAMARA; LINDOSO, JOSE ANGELO; CELESTE, BEATRIZ JULIETA; BITTENCOURT, AMANDA AZEVEDO; DE BRITO, MARIA EDILEUZA FELINTO; DUTHIE, MALCOLM SCOTT; GUDERIAN, JEFFERY; GUERRA, JORGE; OLIVEIRA, ANA LUCIA LYRIO; REED, STEVEN; et al. ELISA with recombinant antigen Lb6H validated for the diagnosis of American tegumentary leishmaniasis. PLoS One, v. 19, n. 6, p. 19-pg., 2024-06-05. (21/12535-2)

FUJIMORI, M.; VALENCIA-PORTILLO, R. T.; LINDOSO, J. A. L.; CELESTE, B. J.; DE ALMEIDA, R. P.; COSTA, C. H. N.. Recombinant protein KR95 as an alternative for serological diagnosis of human visceral leishmaniasis in the Americas (vol 18, e0282483, 2023). PLoS One, v. 18, n. 10, p. 1-pg., 2023-10-12. (21/12535-2, 17/03367-3)