Prototipagem e validação de kit ELISA com antígeno recombinante Lb6H para o diagnóstico sorológico da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA)

Resumo

O diagnóstico da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma questão em aberto em nosso meio, sendo premente a busca de uma solução. Exames laboratoriais são importantes no diagnóstico de LTA, pois as manifestações clínicas, embora muitas vezes sugestivas, não são patognomônicas, havendo necessidade de diagnóstico diferencial. Dos exames laboratoriais, os voltados ao encontro de parasitos em amostras provenientes de lesão são considerados padrão ouro, mas a sensibilidade não é alta; os testes moleculares voltados à detecção de DNA de Leishmania carecem ainda de padronização entre os vários laboratórios. Neste cenário, surge a opção de exames laboratoriais indiretos que detectam a presença de resposta imune à Leishmania, exame sorológico ou teste de hipersensibilidade tardia. Entretanto, o teste de Montenegro (hipersensibilidade tardia), que era utilizado na rotina clínica, não é mais realizado por descontinuidade na produção do antígeno, trazendo problemas ao diagnóstico de LTA. Em estudo recente, nosso grupo avaliou ELISA com antígeno recombinante (r) Lb6H derivado da sequência de Leishmania (Viannia) braziliensis, que mostrou um desempenho excelente, com sensibilidade de 100,0% e especificidade de 98,5% para o diagnóstico dessa condição patológica. Com esses resultados e devido à ausência de consenso em relação à sorologia de LTA, vislumbramos a possibilidade da utilização de rLb6H no diagnóstico dessa leishmaniose. Neste projeto, validaremos teste sorológico, no formato ELISA, utilizando antígeno rLb6H e seguiremos com o desenvolvimento de protótipo de um kit de ELISA-rLb6H para complementar o diagnóstico da LTA. A importância deste projeto é evidente, pois virá suprir, ao ser validado e desenvolvido teste ELISA, a lacuna da inexistência de um teste diagnóstico complementar para a LTA. (AU)