Identificação de perfis moleculares na Síndrome Genética Rara associada a SYNGAP1 em modelos neuronais isogênicos

• Processo: 23/01515-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Acordo de Cooperação: CNPq
• Pesquisador responsável: Mariana Moysés Oliveira
• Beneficiário: Mariana Moysés Oliveira
• Instituição Sede: Associação Fundo de Incentivo à Pesquisa (AFIP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/09089-0 - Edição genética em larga escala para o estudo de doenças do neurodesenvolvimento em modelos celulares isogênicos, AP.JP
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/09760-0 - Identificação de perfis moleculares na síndrome genética rara associada a SYNGAP1 em modelos neuronais isogênicos, BP.JD
• Assunto(s): Neurogenética Síndrome Epilepsia Medicina de precisão Neurodesenvolvimento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: epilepsia | Medicina de Precisão | neurodesenvolvimento | Síndrome Genética Rara | Syngap1 | Neurogenética

Resumo

As encefalopatias epilépticas (EEs) são condições epilépticas caracterizadas por anormalidades epileptiformes associadas à disfunção cerebral progressiva. Um dos genes associados às EEs é o gene SYNGAP1 que está relacionado à atividade sináptica de neurônios excitatórios, de forma que a haploinsuficiência deste gene prejudica o desenvolvimento neuronal. Nesta proposta, vamos estabelecer uma plataforma de engenharia genômica de larga escala baseada em CRISPR que permite edições simultâneas no genoma. Aplicaremos essa plataforma de edição genômica em linhagens humanas de células-tronco pluripotentes induzidas (hiPSC) para a introdução de variantes em SYNGAP1. Estes modelos celulares serão diferenciados em células-tronco neurais e neurônios glutamatérgicos corticais, com o intuito de interrogar as consequências moleculares dessas perturbações genéticas. Teremos os objetivos: 1. Determinar o impacto molecular (perfil transcricional global e inflamatório) de variações genéticas introduzidas por CRISPR através da investigação em modelos neuronais provenientes de linhagens humanas de células-tronco pluripotentes induzidas (hiPSC). 2. Avaliar aspectos fisiológicos (padrão de sono), moleculares (perfil inflamatório) e cognitivos (interação social e aprendizado) de pacientes com variantes em SYNGAP1. 3. Correlacionar as avaliações clínicas realizadas nos pacientes com avaliações realizadas em modelos neuronais in vitro que contenham variantes, visando abordagens de Medicina de Precisão. Este estudo irá, portanto, implementar novas tecnologias, gerar modelos neuronais e integrar datasets para identificar os pontos de convergência em assinaturas moleculares causadas por EE, que em estudos futuros poderão constituir alvos de manipulações farmacológicas. (AU)