Silenciamento gênico de catepsinas B e L mediado por RNAi utilizando o vetor CTV, interfere no desenvolvimento ovariano do psilídeo asiático do citrus(ACP) Diaphorina citri

• Processo: 23/12544-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2024
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitotecnia
• Pesquisador responsável: Andrea Soares da Costa Fuentes
• Beneficiário: Andrea Soares da Costa Fuentes
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Catepsinas Diaphorina citri Greening (doença de planta) Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: catepsinas | Cisteíno peptidases | Citrus tristeza virus | Diaphorina citri | Hlb | Huanglongbing | Biotecnologia

Resumo

Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) é o vetor tranmissor das bactérias Candidatus Liberibacter americanus (CLam) e Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas), que são restritas ao floema e associadas à doença cítrica mais importante e destrutiva do mundo, Huanglongbing (HLB). Atualmente, nenhuma cura para o HLB foi descrita. Portanto, as medidas têm se concentrado na redução das populações de D. citri. Nestes insetos, as enzimas catepsina B (DCcathB) e L (DCcathL) desempenham um papel importante na digestão e estão envolvidas na embriogênese, defesa imunológica e ecdise. Usamos um vetor baseado em CTV para entregar dsRNA (CTV-dsRNA) em plantas Citrus macrophylla visando silenciar os genes DCcathB e DCcathL em D. citri que se alimentaram do floema dessas plantas infectadas com CTV-RNAi. Posteriormente, avaliamos a expressão dos genes DCcathB e DCcathL, bem como do gene Vitelogenina (Vg) por qRT-PCR em D. citri alimentado com CTV-dsRNA ocorrendo no floema vegetal. Além disso, demonstramos um fenótipo defeituoso em fêmeas de D. citri como resultado do silenciamento dos genes DCcathB e DCcathL mediado por CTV-dsRNA. Os psilídeos que se alimentaram de plantas tratadas com o CTV-dsRNA exibiram regulação negativa do gene Vg, um dos genes mais importantes associados ao desenvolvimento embriogênico, que foi associado ao silenciamento mediado por dsRNA dos dois genes da catepsina. Com base em nossas descobertas, uma estratégia baseada em CTV para entrega de RNAi através de plantas que tem como alvo os genes DCcathB e DCcathL pode representar um caminho adequado para o desenvolvimento de ferramentas baseadas em dsRNA para gerenciar D. citri que limita a propagação de HLB. (AU)