Efeito do tratamento com AP39 ou ATB346, doadores de H2S mitocondrial e híbrido, respectivamente, em modelo experimental de trombose: Ensaios in vivo em vasos sanguíneos cerebrais e in vitro

• Processo: 23/05115-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
• Pesquisador responsável: Stephen Fernandes de Paula Rodrigues
• Beneficiário: Stephen Fernandes de Paula Rodrigues
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Marcelo Nicolas Muscara
• Auxílio(s) vinculado(s): 24/02250-9 - Comparação da modulação off-target da nuclease Zinc-finger protein 36 (ZFP36) pelos doadores de sulfeto de hidrogênio citosólico (ATB-346) e mitocondrial (AP-39) sobre o fenótipo endotelial pró-trombótico e pró-inflamatório, AP.R
• Assunto(s): Coagulação sanguínea Encéfalo Sulfeto de hidrogênio Cardiovascular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ave | coagulação sanguinea | encéfalo | Sulfeto de Hidrogenio | Vasos sanguíneos cerebrais | Cardiovascular

Resumo

A coagulação sanguínea é um processo complexo que envolve uma cadeia de eventos extra e intravasculares, extra e intracelulares que normalmente culminam na formação de um trombo e consequente hemostasia, em situações que de outra forma poderiam levar à importante perda de sangue e consequente morte. Entretanto, é necessário que este processo seja cuidadosamente regulado para evitar a formação excessiva e desnecessária de trombos, que poderiam levar à hipóxia e morte tecidual. De fato, a trombose é uma das principais causas de morbidade e mortalidade no mundo, uma vez que está diretamente relacionada a doenças fatais e extremamente frequentes na população, como o infarto agudo do miocárdio (IAM) e o acidente vascular encefálico isquêmico (AVEi). Existem dois tipos de trombose, a arterial e a venosa. Medicamentos antitrombóticos e antiplaquetários são eficazes no tratamento preventivo e/ou terapêutico dessas condições, todavia, o principal efeito colateral é a hemorragia, que pode ser fatal. Além disso, anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs), que são agentes antiplaquetários largamente utilizados na clínica, comumente levam a reações adversas gastrintestinais. Sendo assim, faz-se necessário a busca por novos medicamentos que possuam um perfil de ação mais seguro. Sabe-se que a hemostasia fisiológica pode ser influenciada por gasomediadores, dentre eles, o sulfeto de hidrogênio (H2S). Devido à natureza extremamente lábil do H2S, doadores com maior tempo de meia vida foram desenvolvidos para atuar como potenciais agentes terapêuticos, incluindo o AP39 e o ATB-346. O AP39 é um doador rápido de liberação mitocondrial de H2S que mostrou efeito citoprotetor em diversos tipos celulares, como células endoteliais e plaquetas, submetidas a condições de estresse oxidativo. O ATB-346, por sua vez, é um doador de H2S acoplado ao naproxeno. Este AINE, bem como o ATB-346, reduz rapidamente e de forma prolongada a atividade da ciclooxigenase (COX), efeito importante para diminuir a inflamação. Entretanto, enquanto o naproxeno frequentemente causa reações adversas gastrintestinais, tal efeito não foi observado com o ATB-346. Apesar de processos oxidativos, inflamatórios e trombóticos frequentemente se intercomunicarem, não se sabe se esses doadores de H2S exercem efeito antitrombótico e/ou antiplaquetário. Assim, utilizaremos ensaios in vivo e in vitro, além de moleculares, para medir a atividade antitrombótica e antiplaquetária do AP39 e do ATB-346. Nos ensaios in vivo serão utilizados vasos piais cerebrais de camundongos e medidos os tempos para indução do trombo e oclusão dos vasos sanguíneos piais. Esses vasos foram selecionados por serem palco do AVEi. Adicionalmente, serão dosados no cérebro: espécies reativas de oxigênio (EROs), in vivo, em região perivascular, concentrações de tromboxano B2 (TXB2), prostaciclina (PGI2) e H2S, as expressões de cistationina beta sintase (CBS), principal enzima produtora de H2S cerebral, caspase 1 e interleucina 1 beta (IL-1²). Foi visto que o H2S pode exercer parte dos seus efeitos via eixo caspase 1/IL1 ². In vitro, serão medidos os tempos de protrombina (TP) e de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e a concentração de fibrinogênio em plasma pobre em plaquetas, as expressões plaquetárias de ±IIb²III integrina e de P-selectina em plaquetas estimuladas com trombina ou ADP e o tempo para formação de trombos em plasma rico em plaquetas, estimulado ou não com trombina ou ADP, bem como as concentrações de TXB2 e H2S neste meio. Serão medidas também a presença de lesões no estômago e realizado o plaquetograma. Assim, esperamos juntar evidências que contribuam com o uso do AP39 e/ou do ATB-346 como potenciais terapias eficazes para doenças trombóticas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MACHADO, NICOLLE R.; MIYAZAKI, MIKA A.; OLIVEIRA, THAYNA D.; DIAS, KARINA T.; COLLI, LUCAS G.; BELARDIN, LARISSA B.; BERTOLLA, RICARDO P.; RODRIGUES, STEPHEN F.. Systemic alpha-1 adrenergic receptor inhibition reduces sperm damage in adult and aging spontaneously hypertensive rats. SCIENTIFIC REPORTS, v. 14, n. 1, p. 13-pg., 2024-11-20. (23/05115-2, 20/12616-0, 20/07212-7)