Estudo da obtenção de proteínas recombinantes de veneno de serpentes, em escala intermediária, através do sistema de expressão em Pichia pastoris

• Processo: 94/04443-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 1995
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 1997
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Euridice Carmona
• Beneficiário: Euridice Carmona
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Venenos de serpentes Leveduras Proteínas recombinantes Pichia pastoris
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alfa-Neurotoxinas | Levedura | Pichia Pastoris | Proteinas Recombinantes | Serino Proteinases | Veneno De Serpentes

Resumo

O presente projeto tem por finalidade a expressão de proteínas heterólogas na levedura Pichia pastoris. As proteínas de interesse são componentes do veneno de 2 espécies de serpentes: Micrurus corallinus (coral verdadeira) e Bothrops jararaca. Pretende-se obter inicialmente a α-neurotoxina de veneno da serpente coral, um polipeptídeo que atua no sistema nervoso central. O cDNA desta toxina já está disponível podendo ser sub-clonado imediatamente nos vetores de expressão da levedura. Com relação a serpente B. jararaca, o estudo será focalizado nas serino-proteinases presentes em seu veneno, que são enzimas proteolíticas indutoras de diversas ações lesivas teciduais. Os experimentos para a obtenção dos cDNAs destas proteinases já está em andamento. Assim que forem obtidos, estes cDNAs também serão clonados em vetores de expressão para P. pastoris. O objetivo principal deste trabalho e a obtenção de proteínas recombinantes do veneno destas serpentes, importantes como fonte antigênica para a produção de soro anti-ofídico. Além disto um estudo bioquímico e farmacológico detalhado destas proteínas poderá ser feito de maneira mais racional e dinâmica, independente do fornecimento destes venenos, assim como através da utilização de técnicas de Biologia Molecular como a mutação sítio-dirigida. (AU)