miRNA plasmáticos que atuam como normalizadores em Pacientes com COVID-19

• Processo: 24/18059-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2025
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Eder de Carvalho Pincinato
• Beneficiário: Eder de Carvalho Pincinato
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): COVID-19 MicroRNAs Técnicas de laboratório clínico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Covid | gravidade da doença | miRNA | Análises Clínicas

Resumo

Quando utilizamos a técnica de RT-qPCR para avaliação quantitativa da expressão de microRNAs (miRNAs), é essencial normalizar os dados por meio de miRNA endógeno estável. No entanto, não existe um miRNA de referência universalmente adequado. Portanto, este estudo teve como objetivo determinar, por meio da técnica de RNA-Seq, o normalizador endógeno mais adequado para a avaliação da expressão de miRNAs plasmáticos em pacientes com a Doença do Coronavírus 2019 (COVID-19). Foram realizados dois sequenciamentos em larga escala: a) para identificar miRNAs diferencialmente expressos entre pacientes com COVID-19 e voluntários saudáveis (n = 12); e b) para identificar miRNAs diferencialmente expressos entre pacientes com COVID-19 grave e aqueles com COVID-19 leve (n = 8). Os candidatos a normalizadores endógenos foram selecionados de acordo com os seguintes critérios: (1) o miRNA deve ter uma regulação de dobra igual a 1; (2) o miRNA deve ter um valor de p > 0,990; e (3) selecionar aqueles miRNAs que foram descobertos há mais tempo. Quatro miRNAs (hsa-miR-34a-3p, hsa-miR-194-3p, hsa-miR-17-3p e hsa-miR-205-3p) atenderam a todos os critérios e foram escolhidos para validação por RT-qPCR em uma coorte de 125 pacientes. Dentre eles, apenas hsa-miR-34a-3p e hsa-miR-205-3p foram mostrados como normalizadores endógenos elegíveis no contexto da doença COVID-19, pois sua expressão se manteve estável entre os grupos comparados. (AU)