Estudo do papel da metilação m6A no direcionamento de miRNAs para vesículas extracelulares durante a obesidade e diabetes tipo 2

• Processo: 24/20515-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Pesquisador Visitante - Internacional
• Data de Início da vigência: 21 de maio de 2025
• Data de Término da vigência: 18 de agosto de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Marcelo Alves da Silva Mori
• Beneficiário: Marcelo Alves da Silva Mori
• Pesquisador visitante: Dr Rajesh Kumari
• Instituição do Pesquisador Visitante: University Of Allahabad/Ua, Índia
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/08354-2 - A ação recíproca do sistema imune e do metabolismo como principal determinante do processo de envelhecimento, AP.TEM
• Assunto(s): Adipócitos Diabetes mellitus Vesículas extracelulares MicroRNAs Obesidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adipocytes | diabetes | extracellular vesicles | MicroRNAs | N6-methyladenosine RNA methylation | Obesity | Obesidade

Resumo

A proposta visa descobrir o papel da metilação de RNA N6-metiladenosina (m6A) no processo de triagem e empacotamento de microRNAs (miRNAs) em vesículas extracelulares durante a obesidade e o diabetes. A metilação m6A em eucariotos é realizada principalmente por três complexos proteicos essenciais: "writers" (metiltransferases), "erasers" (desmetilases) e "readers" (complexo efetor de m6A). Os "writers" são responsáveis por adicionar o grupo metil, enquanto os "erasers" exercem uma função oposta, removendo o grupo metil por desmetilação oxidativa. Os "readers" se ligam aos RNAs metilados em m6A e alteram suas funções. A metilação de RNA m6A demonstrou regular a maioria dos aspectos importantes da biologia do RNA, incluindo exportação nuclear, splicing, estabilidade, tradução de mRNA e separação em fase para grânulos lipídicos em várias funções específicas. As vesículas extracelulares (VEs) são nanotransportadores que regulam a comunicação intercelular, transferindo proteínas, DNA e RNA, incluindo miRNAs. A triagem e o empacotamento de diferentes miRNAs não são bem compreendidos, e o conteúdo alterado das VEs está associado a diversas doenças, como obesidade, diabetes tipo 2 (T2D) e doenças cardiovasculares. Assim, nesta proposta, buscamos descobrir o papel da metilação m6A em condições de disfunção metabólica. Primeiro, isolaremos VEs de amostras de sangue de indivíduos com obesidade (com e sem T2D) e de adipócitos após exposição a estresse metabólico. Em seguida, isolaremos miRNAs dessas VEs e separaremos os miRNAs metilados em m6A utilizando anticorpos para m6A. As amostras serão submetidas à imunoprecipitação de RNA metilado e sequenciamento, seguidos de análise computacional para explorar o perfil diferencial de miRNAs triados. No geral, esta proposta não apenas identificará e validará o conteúdo diferencial de VEs de indivíduos com obesidade e T2D estabelecido, mas também desvendará o papel regulador da m6A durante o carregamento de conteúdo de miRNAs em VEs sob estresse metabólico. (AU)