Projeto EMU: Aquisição de equipamento que automatiza a separação de proteínas por tamanho e a imunodetecção no Western blotting tradicional por quimioluminescência ou fluorescência - JESS da Protein Simple

• Processo: 23/17365-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Infraestrutura - Pequeno Médio Porte
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2027
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos
• Pesquisador responsável: Elizabeth Aparecida Ferraz da Silva Torres
• Beneficiário: Elizabeth Aparecida Ferraz da Silva Torres
• Instituição Sede: Faculdade de Saúde Pública (FSP). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Marcelo Macedo Rogero ; Regina Mara Fisberg
• Assunto(s): Compostos bioativos Eletroforese Nutrientes Proteínas Saúde pública Western blotting
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Compostos bioativos | Eletroforese | Nutrientes | Proteinas | Saúde Pública | western blotting | Engenharia II

Resumo

O padrão dietético ocidental favorece o aumento da prevalência de sobrepeso e obesidade, acompanhados por distúrbios fisiológicos, como hiperglicemia, hiperinsulinemia, hiperlipidemia e hipertensão arterial, as quais, por sua vez, provocam estresse oxidativo e aumento de mediadores pró-inflamatórios, condições que favorecem o desenvolvimento da resistência à ação da insulina e da disfunção endotelial. Essas alterações metabólicas predispõem ao desenvolvimento da síndrome metabólica, e o excesso de gordura corporal resultante pode resultar em inflamação crônica e de baixa intensidade, em que a ativação do sistema imune ocorre na ausência de infecção ou doença autoimune, afetando não apenas uma região ou tecido específico, mas diferentes sistemas fisiológicos. Por isso, é de suma importância a investigação de proteínas relacionadas a esses sistemas, e sua interação com componentes alimentares e matrizes complexas. A aquisição do sistema JESS busca trazer soluções analíticas de alta qualidade para pesquisas relacionadas a proteínas específicas e sua relação com doenças e saúde do indivíduo. Essa tecnologia inovadora reúne as técnicas ELISA (quantificação absoluta de proteínas específicas) e Western Blotting (quantificação relativa de proteínas específicas, com imagens) em uma única análise, aliando rapidez e utilização de pequeno volume de reagentes, amostra e anticorpos. A automatização trazida pelo equipamento JESS elimina muitos passos passíveis de erro relacionados às técnicas de Western Blotting e ELISA, pois basta adicionar as amostras nas microplacas específicas para eliminar lavagens, incubações e etapas de detecção complexas. Usualmente análises de Western Blotting demoram cerca de 2 a 3 dias, e análises de ELISA cerca de 4 a 8 horas. A análise no JESS dura cerca de 3 horas, e reduz em até 90% o volume de amostras, reagentes e anticorpos em relação às técnicas tradicionais. Ademais, o equipamento não necessita de preparo específico para instalação, uma bancada de um metro por cinquenta centímetros e uma tomada são suficientes, e não é necessária manutenção a curto e médio prazos. O Departamento de Nutrição possui capacidade técnica e infraestrutura necessários para aquisição do equipamento, o qual será amplamente utilizado por pesquisadores de todo o Brasil.Palavras-chave: JESS, Protein Simple, identificação e quantificação de proteínas. (AU)