Emu: aquisição de citômetro de fluxo para separação celular/cell sorter para realização de ensaios funcionais em células isoladas de diferentes tecidos murinos

• Processo: 23/17166-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Infraestrutura - Pequeno Médio Porte
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2027
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Hosana Gomes Rodrigues
• Beneficiário: Hosana Gomes Rodrigues
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Aplicadas (FCA). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Limeira , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Adriana Souza Torsoni ; Dennys Esper Corrêa Cintra ; Eduardo Rochete Ropelle ; José Rodrigo Pauli ; Marcio Alberto Torsoni
• Assunto(s): Citometria de fluxo Imunofenotipagem
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citometria de fluxo | imunofenotipagem | sorting | Citometria

Resumo

As pesquisas em Ciências da Vida estão cada vez mais voltadas para explicar de maneira "single cell" alterações genéticas, metabólicas/funcionais responsáveis pela etiologia de doenças ou de processos fisiológicos. Para tanto, são utilizadas técnicas como sequenciamento de RNA de células únicas (single cell RNA sequencing) para identificar modificações na expressão gênica global e o isolamento de células por citometria de fluxo (Flow Cytometry Cell Sorting) para isolar determinado tipo celular e assim avaliar respostas funcionais a determinadas condições e estímulos. Neste sentido, é fundamental garantir uma alta taxa de viabilidade celular da população sorteada, pois ensaios funcionais como co-cultura de células sorteadas, análises de metabolismo celular em tempo real, diferenciação de células progenitoras...exigem que as células estejam vivas no momento das análises. Desta forma, se faz essencial que os pesquisadores tenham o Cell Sorter o mais próximo possível dos seus laboratórios, evitando assim problemas envolvendo o transporte de amostras para outras cidades e a concorrência por horário de uso mais restritivo, diminuindo a viabilidade das amostras. O modelo escolhido para compor nosso centro de pesquisa é o Citômetro de Fluxo para Separação Celular/Cell SorterBD FACSMelodyTM equipado com três laseres (azul, vermelho e violeta) e capaz de analisar 11 parâmetros simultaneamente (tamanho, complexidade e 9 marcadores fluorescentes), permitindo uma caracterização mais completa e precisa de uma amostra heterogênea. Considerando o fato de que as amostras que analisamos frequentemente possuem células raras ou expressando marcadores em baixa densidade, o laser violeta permitirá uma maior sensibilidade na detecção de sinal e identificação destes marcadores, pois é capaz de excitar fluorocromos de alto brilho. Quanto ao caráter multiusuário, esclarecemos que muitos projetos e pesquisadores farão uso do novo equipamento e a sua a inserção na FCA irá modernizar e melhorar a qualidade dos projetos elevando a Instituição a um novo patamar com os trabalhos que serão publicados em periódicos de alto impacto utilizando essa moderna plataforma.Levando em consideração as diferentes pesquisas realizadas na FCA e que estão diretamente associadas à presente solicitação, destacamos que este equipamento alavancará de sobremaneira os projetos em andamento e os futuros. Mesmo tendo outros citômetros de fluxo, do tipo Cell Sorter, na UNICAMP, reforçamos que os mesmos estão em diferentes Faculdades e Institutos localizados em Barão Geraldo, Campinas, distante 60 Km do campus da FCA, em Limeira. Assim, o transporte das amostras por mais de 1 hora, mesmo que em gelo, reduz consideravelmente a viabilidade celular de forma a inviabilizar as análises. Somado a isso, a utilização de técnicas complementares com as células sorteadas, como a cultura celular, demanda o uso de infraestrutura, como cabines de biossegurança e estufas, as quais normalmente não estão disponíveis para pesquisadores de outros grupos. Desta forma, mesmo que as células cheguem em Campinas com boa taxa de viabilidade, elas precisarão ser transportadas de volta à FCA, em Limeira, para que os experimentos sejam realizados. Isso tira qualquer possibilidade de sucesso!Desta forma, é mandatório que tenhamos esse equipamento disponível a poucos metros dos laboratórios da FCA. Mais de 14 grupos de pesquisa, da área da Saúde na FCA, preveem a utilização do Citômetro de Fluxo BD FACSMelody Cell Sorter em seus projetos. (AU)