Estudo de vesículas extracelulares como vacina contra Streptococcus pneumoniae: papel de fatores de virulência e sistemas de dois componentes

• Processo: 24/18870-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2028
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Eliane Namie Miyaji
• Beneficiário: Eliane Namie Miyaji
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Leo Kei Iwai ; Maria Leonor Sarno de Oliveira ; Natalia Luisa Hiller
• Assunto(s): Fatores de virulência Streptococcus pneumoniae Vacinas Desenvolvimento de vacinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fatores de virulência | sistemas de dois componentes | Streptococcus pneumoniae | Vacina | vesículas extracelulares bacterianas | Desenvolvimento de vacinas

Resumo

Streptococcus pneumoniae é o agente causador de diversas doenças como otite média, sinusite, pneumonia, sepse e meningite. As vacinas conjugadas polissacarídicas levaram a uma redução significativa em doença pneumocócica invasiva causada pelos sorotipos contidos na formulação vacinal, mas foi observada substituição por sorotipos não-vacinais. Além disso, após um período de diminuição de doença pneumocócica durante a adoção de medidas não-farmacológicas durante a pandemia de COVID-19, diferentes países começam a reportar casos de doença pneumocócica acima dos níveis pré-pandêmicos. Novas formulações são, portanto, necessárias para o controle das doenças causadas pelo pneumococo. Esse projeto visa à avaliação de vesículas extracelulares de pneumococo (pEVs) como uma formulação vacinal capaz de induzir proteção independente de sorotipo. Os protocolos de produção e caracterização das pEVs já estão sendo estabelecidos em nosso laboratório. As pEVs serão produzidas a partir do isolado não-encapsulado Rx1 e caracterizadas quanto à concentração proteica, tamanho, concentração de partículas, carga e índice de polidispersão. As pEVs também serão caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura e será realizada análise proteômica por espectrometria de massas. Serão produzidas pEVs derivadas de Rx1 selvagem e nocautes para as proteínas PspA (Pneumococcal surface protein A), PspC (Pneumococcal surface protein C) e Ply (Pneumolysin). Tratam-se de importantes fatores de virulência do pneumococo que já foram descritos como candidatos vacinais. Iremos avaliar o papel desses antígenos na proteção induzida pela imunização parenteral e nasal com pEVs contra desafio letal e de colonização da nasofaringe em camundongos. Serão produzidas também pEVs a partir de linhagens de Rx1 expressando diferentes variantes de PspA e de PspC. Como se tratam de antígenos variáveis, a formulação com diferentes pEVs contendo variantes destes antígenos possui potencial de ampliar a cobertura vacinal contra diferentes isolados de pneumococo. Além disso, serão avaliados nocautes na histidina quinase (Histidine Kinase - HK) de 3 sistemas de dois componentes (Two-Component System - TCS) do pneumococo, com possível impacto na produção de pEVs. Os dados obtidos por este projeto podem trazer informações importantes para o desenvolvimento de uma vacina de baixo custo e ampla cobertura contra infecções causadas por S. pneumoniae. (AU)