Bases moleculares da especificidade enzimatica.

• Processo: 01/08198-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2004
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Sandro Roberto Marana
• Beneficiário: Sandro Roberto Marana
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Glicosídeo hidrolases Especificidade Enzimas beta-Glicosidases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Beta-Glicosidases | Enzimas | Especificidade | Glicosideo Hidrolases

Resumo

A especificidade de uma enzima é função das interações não-covalentes entre os aminoácidos do sítio ativo e o estado de transição da reação. Logo a modificação planejada da especificidade de uma enzima depende do conhecimento do comportamento da energia das interações não-covalentes em função da troca dos aminoácidos do sítio ativo. Este projeto se propõe a obter esta informação para uma beta-glicosidase. Para tal esta enzima será expressa como proteína recombinante, aminoácidos do sítio ativo serão substituídos via mutação sítio-dirigida, as enzimas mutantes serão purificadas e as energias de interações não-covalentes no complexo ESI serão determinadas a partir de constantes de velocidade obtidas em experimentos de cinética enzimática. Assim este projeto contribui para compreensão da especificidade das enzimas em geral, o que tem implicações na construção de enzimas com especificidade pré-planejadas, no desenho de inibidores e previsão da função de enzimas a partir de sua estrutura primária e terciária. (AU)