Investigação clínica e citogenetica-molecular em rearranjos cromossômicos não balanceados: caracterização molecular em culturas primárias de linfócitos e estabelecimento de linhagens celulares linfoblastoides

• Processo: 05/60813-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Maria Isabel de Souza Aranha Melaragno
• Beneficiário: Maria Isabel de Souza Aranha Melaragno
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Citogenética Linfócitos Aberrações cromossômicas Duplicação cromossômica Deleção cromossômica Hibridização in situ fluorescente Hibridização genômica comparativa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aberracoes Cromossomicas | Cgh | Citogenetica | Fish

Resumo

A diversidade das anormalidades cromossômicas responsáveis por doenças genéticas humanas sempre representou um desafio para a citogenética. O aprimoramento da citogenética molecular, especialmente a técnica de hibridação in situ por fluorescência (FISH), tem permitido o reconhecimento de um número cada vez maior de aberrações cromossômicas e uma melhor compreensão do papel da arquitetura genômica na formação desses rearranjos. No presente trabalho, investigaremos pacientes portadores de rearranjos cromossômicos não balanceados previamente diagnosticados por bandamento G. Estudaremos pacientes com duplicação 1q, pacientes com deleção18q e pacientes com cromossomos marcadores super numerários quanto a: investigação da origem do segmento cromossômico em desequilíbrio, caracterização molecular dos pontos de quebra cromossômica, estudo dos mecanismos envolvidos na formação das alterações estruturais, e correlação dessas anormalidades com as alterações fenotípicas. A investigação citogenética molecular será realizada por meio da técnica de FISH com sondas de cromossomos artificiais de bactérias (BACs) e da técnica de hibridação genômica comparativa (CGH). Para obtermos material suficiente dos pacientes para investigações mais detalhadas das alterações cromossômicas, dentre os casos analisados, os de maior interesse serão selecionados para o estabelecimento de linhagens linfoblastoides, pela técnica de transformação dos linfócitos por meio do vírus Epstein-Barr. A imortalizarão dos linfócitos e preservação das linhagens linfoblastoides permitirá a formação de uma coleção de células de portadores de alterações cromossômicas e representará uma fonte inesgotável de recursos para estudos genéticos posteriores. (AU)