Prospecção de mensagens de competência oocitária em um modelo retrospectivo

• Processo: 06/55040-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2008
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Flávio Vieira Meirelles
• Beneficiário: Flávio Vieira Meirelles
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Assunto(s): Fertilização in vitro animal Embriogênese Oócitos Blastócito Herança extracromossômica RNA mensageiro Bovinos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Arranjo | Bovino | Competencia Oocitaria | Fecundacao In Vitro | Heranca Citoplasmatica | Mrna

Resumo

Há tempos que oócitos bovinos podem ser maturados (MIV), fertilizados (FIV) e cultivados in vitro (CIV) até os estádios de mórula e blastocisto. Entretanto uma grande variação do potencial do desenvolvimento é observada e imputada aos oócitos. A morfologia e a biologia (cinética de maturação, por exemplo) destes gamelas e suas células associadas (COCs) são geralmente utilizadas como fator capaz de predizer a competência de desenvolvimento embrionário. No entanto apesar de uma alta correlação entre estas características e a capacidade de atingir o estádio de blastocisto, não há uma só medida que indique com 100% de certeza que o oócito avaliado tenha potencial de desenvolver (por exemplo, COCs de baixa qualidade produzem aproximadamente 20% de blastocistos e de 50 à 60% dos COCs de alta qualidade não atingem o estádio de blastocisto). Nesta proposta, descrevemos um método, proposto e testado em nosso laboratório (ver figura 1 no Anexo 1), que permite coletar uma biópsia do citoplasma (citoplasto) de um oócito em metáfase II. A ativação e o cultivo individualizado permitem medir o potencial de desenvolvimento do gameta. Finalmente a análise da biópsia (retrospectiva) permite estimar a quantidade (acDNA) e a qualidade (amRNA) dos transcritos presentes no citoplasma de oócitos competentes ou incompetentes. (AU)