Análise da expressão de transcritos e proteínas COX-2, AKT, NFKB, ikc, MTOR e CD1 em cultura de células de carcinomas epidermóides de cabeça e pescoço tratadas com CELECOXIB

• Processo: 07/00870-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Decio dos Santos Pinto Junior
• Beneficiário: Decio dos Santos Pinto Junior
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Patologia bucal Neoplasias de cabeça e pescoço Carcinoma de células escamosas Fator de crescimento epidérmico Proliferação celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Akt | Carcinogênese | Carcinoma Epidermoíde | Celecoxib | quimioterapia | vias de sinalização | Patologia Bucal

Resumo

Diversas alterações genéticas estão associadas à patogênese do carcinoma epidermóide (CE), a neoplasia maligna mais comum de cabeça e pescoço. Algumas dessas alterações comprometem proteínas pertencentes à via de sinalização do AKT, envolvida em diferentes fenômenos celulares. A proteína COX-2, descrita inicialmente em processos inflamatórios, está associada com a oncogênese e recentemente tem sido associada com a via de sinalização AKT. Este trabalho tem como objetivos estudar a expressão dos transcritos e das proteínas pAKT, NF-kB, IKB, mTOR, ciclina D1 e COX-2, todas envolvidas na via de sinalização do AKT em linhagens celulares de carcinomas epidermóides, de forma a verificar possíveis alterações na transcrição e tradução dessas moléculas em células de CE estimuladas ou não com EGF e tratadas com CELECOXIB. Serão utilizadas quatro linhagens celulares de CE de cabeça e pescoço e uma linhagem de queratinócitos normais que serão divididas em três grupos: a. grupo controle não tratado, b. células tratadas com Celecoxib, c. células estimuladas com EGF e tratadas com Celecoxib. A proliferação celular será monitorada através de curva de crescimento e teste de viabilidade celular. A análise da expressão e interação das proteínas será realizada através da técnica do Western Blotting e imunoprecipitação. A localização intracelular das proteínas será verificada através da Imunofluorescência e a verificação da apoptose será feita através da técnica TUNEL. A quantificação dos transcritos será feita pela técnica do PCR em tempo real. Desta forma, será entendida em maior profundidade a ação do Celecoxib na via do AKT em carcinomas epidermóides de cabeça e pescoço. (AU)