Estudo dos mecanismos moleculares associados à proteína SET com impacto na tumorigênese e progressão do câncer oral

• Processo: 13/10898-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2013
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Carlos Curti
• Beneficiário: Carlos Curti
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Carlos Curti
• Assunto(s): Oncologia Neoplasias de cabeça e pescoço Carcinoma de células escamosas Transdução de sinais Expressão gênica MicroRNAs Instabilidade genômica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cancer oral | expressão | instabilidade genômica | invasão celular | sinalização celular | tumorigenese | oncologia molecular

Resumo

Este projeto visa à continuidade do estudo molecular e bioquímico da proteína SET na tumorigênese e na progressão e disseminação de tumores sólidos tendo como modelo/abordagem experimental o carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (HNSCC). A principal frente de investigação fundamenta-se no impacto desta proteína em vias de sinalização intracelular importantes para tumorigênese. Em nível molecular, os mecanismos de ação desta proteína no câncer oral ainda não são suficientemente compreendidos, embora várias funções tenham sido já descritas. Recentemente, nosso grupo mostrou o forte acúmulo da SET em amostras HNSCC, seu envolvimento na via de sinalização Akt em resposta ao estresse oxidativo e sua potencial função na resposta a danos no DNA. Além disto, no projeto anterior, obtivemos evidências de que o nível da SET na célula altera o nível de alguns miRNAs e RNAs de diversos fatores de transcrição alterados em câncer, fato este que sugere sua ação em controle de expressão. Obtivemos também evidências do seu envolvimento com invasão celular, diferenciação epitélio-mesenquimal e com resposta imune contra tumores xenoenxerto em camundongo nude a partir de linhagem HNSCC com a SET silenciada. Todos estes dados apontam para novas funções da proteína SET que podem contribuir para o câncer. Entretanto, os mecanismos moleculares relacionados com as ações descritas acima ainda não foram determinados, pois depende de mais estudos. Sendo assim, propomos neste projeto definir alguns dos mecanismos moleculares pelos quais a proteína SET contribui para a tumorigenese e a progressão do câncer oral. Para responder esta pergunta serão utilizadas linhagens celulares HNSCC (HNSCC: HN13, HN12, HN6, CAL-27), NOK-SI (queratinócito espontaneamente imortalizado) e a linhagem renal HEK293 (todas cedidas pelo Dr. J.Silvio Gutkind, NIH, EUA), após knockdown ou superexpressão da proteína de interesse. Estratégias de biologia celular e molecular e bioquímica serão empregadas no estudo funcional da proteína usando modelo in vitro e in vivo. Western blotting e imunofluorescência serão métodos utilizados para determinar o status (fosforilação e nível) das proteínas e distribuição na célula. Vários métodos e estratégias serão usados: RNA de interferência, sistemas de PCR array em tempo real, PCR em tempo real para miRNA, PCR, screening de quinases fosforiladas usando um sistema Antibody Array, interação proteína-proteina, ELISA, citometria de fluxo, proliferação celular, invasão, análise de metilação por PCR e PCR em tempo real, microscopia, formação de tumores xenoenxerto em camundongo nude, entre outros. Espera-se nesta proposta identificar os mecanismos moleculares associados a SET que favorecem o desenvolvimento e a progressão do câncer oral, com ênfase nas seguintes ações: instabilidade genômica, metilação de DNA, expressão de miRNAs, fosforilação de quinases, diferenciação epitélio-mesenquimal, resposta imune tumoral. A abordagem é multidisciplinar e permitirá ampliar o entendimento sobre as funções da SET no câncer oral. (AU)

Publicações científicas

(11)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

GOTO, RENATA NISHIDA; SOBRAL, LAYS MARTIN; SOUSA, LUCAS OLIVEIRA; GARCIA, CRISTIANA BERNADELLI; LOPES, NORBERTO PEPORINE; MARIN-PRIDA, JAVIER; OCHOA-RODRIGUEZ, ESTAEL; VERDECIA-REYES, YAMILA; LAZARO PARDO-ANDREU, GILBERTO; CURTI, CARLOS; et al. Anti-cancer activity of a new dihydropyridine derivative, VdiE-2N, in head and neck squamous cell carcinoma. European Journal of Pharmacology, v. 819, p. 198-206, JAN 15 2018. (13/01355-7, 13/10898-4)

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OUCHIDA, AMANDA TOMIE; UYEMURA, VALERIA TUDELLA; QUEIROZ, ANDRE LIMA; BRAUER, VERONICA SOARES; CAVALCANTI-NETO, MARINALDO PACIFICO; SOUSA, LUCAS OLIVEIRA; UYEMURA, SERGIO AKIRA; CURTI, CARLOS; LEOPOLDINO, ANDREIA MACHADO. SET protein accumulation prevents cell death in head and neck squamous cell carcinoma through regulation of redox state and autophagy. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR CELL RESEARCH, v. 1866, n. 4, p. 623-637, APR 2019. (09/52228-0, 13/10898-4, 16/19103-2)

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PADOVANI, KARINA STRINGHETTA; GOTO, RENATA NISHIDA; FUGIO, LAIS BRIGLIADORI; GARCIA, CRISTIANA BERNADELLI; ALVES, VANI MARIA; BRASSESCO, MARIA SOL; GREENE, LEWIS JOEL; REGO, EDUARDO MAGALHAES; LEOPOLDINO, ANDREIA MACHADO. Crosstalk between hnRNP K and SET in ATRA-induced differentiation in acute promyelocytic leukemia. FEBS OPEN BIO, v. 11, n. 7, p. 2019-2032, JUL 2021. (13/01355-7, 13/00374-8, 13/10898-4, 13/08135-2, 16/19103-2)

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ALMEIDA, LUCIANA O.; GARCIA, CRISTIANA B.; MATOS-SILVA, FLAVIA A.; CURTI, CARLOS; LEOPOLDINO, ANDREIA M.. Accumulated SET protein up-regulates and interacts with hnRNPK, increasing its binding to nucleic acids, the Bcl-xS repression, and cellular proliferation. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 445, n. 1, p. 196-202, FEB 28 2014. (07/02223-6, 09/52228-0, 09/10783-7, 10/20384-0, 13/10898-4)

ALMEIDA, LUCIANA O.; GOTO, RENATA N.; NETO, MARINALDO P. C.; SOUSA, LUCAS O.; CURTI, CARLOS; LEOPOLDINO, ANDREIA M.. SET overexpression in HEK293 cells regulates mitochondrial uncoupling proteins levels within a mitochondrial fission/reduced autophagic flux scenario. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 458, n. 2, p. 300-306, MAR 6 2015. (09/52228-0, 13/01355-7, 09/10783-7, 10/20384-0, 13/10898-4)

MARIN-PRIDA, JAVIER; LIBERATO, JOSE LUIZ; LLOPIZ-ARZUAGA, ALEXEY; STRINGHETTA-PADOVANI, KARINA; PAVON-FUENTES, NANCY; MACHADO LEOPOLDINO, ANDREIA; GUIROLA CRUZ, OSMANY; HERNANDEZ GONZALEZ, IGNACIO; LEON PEREZ, MARIELA; CAMINS, ANTONI; et al. Novel Insights into the Molecular Mechanisms Involved in the Neuroprotective Effects of C-Phycocyanin against Brain Ischemia in Rats. CURRENT PHARMACEUTICAL DESIGN, v. 28, n. 14, p. 11-pg., 2022-01-01. (13/10898-4, 13/00374-8)