Análise da proteína hnRNPK nas linhagens celulares NB4 e NB4-R2 de leucemia promielocítica aguda com ênfase na patogênese e na diferenciação celular pelo ácido all-trans retinóico

Resumo

A Leucemia Promielocítica Aguda (LPA) é caracterizada principalmente pela translocação cromossomal t(15,17), que culmina com a fusão dos genes PML (Proteína Leucêmica Promielocítica) e RARa (Receptor de Ácido Retinóico), gerando o oncogene PML-RARa. Este gene codifica um receptor de ácido retinóico mutante que contribui para a leucemogênese interferindo no processo de diferenciação celular bloqueando a mesma no estágio promielocítico. A translocação t(11,17) (q23,21), que também culmina em leucemia promielocítica aguda, gera o oncogene PLZF-RARa, responsável pela resistência ao ácido all-trans retinóico (ATRA). O ATRA ao contrário dos quimioterápicos que visam eliminar as células neoplásicas é usado na terapia antineoplásica para induzir a diferenciação e maturação dos promielócitos neoplásicos em granulócitos. O tratamento propicia bom prognóstico, porém é desfavorável quando a célula leucêmica é resistente ao ATRA. O objetivo do presente projeto é avaliar o papel da proteína hnRNPK na leucemia promielocítica aguda e na indução da diferenciação celular granulocítica, utilizando células NB4 e NB4-R2 humanas tratadas ou não com ATRA na presença ou ausência da proteína hnRNPK. O aumento dessa proteína já foi descrito em diversos tumores, mas a possível participação da hnRNPK no mecanismo de leucemogênese da LPA e na diferenciação celular ainda precisa ser definida. Resultados preliminares obtidos mostram que há alteração na distribuição celular da hnRNPK nas células NB4 submetidas ao tratamento com ATRA, o que indica participação desta proteína no processo. Será realizado o silenciamento de hnRNPK usando RNA de interferência (shRNA) nas células NB4 e NB4-R2 e as mesmas serão submetidas a ensaios de: proliferação celular, viabilidade celular, sensibilidade ao ATRA/diferenciação. (AU)