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Lesão induzida pela hipóxia e reoxigenação em intestino de ratos recém-nascidos. Modulação promovida pela L-arginina e pelo pré-condicionamento isquêmico remoto na fase intrauterina

Processo: 07/06754-6
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2008
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2010
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
Pesquisador responsável:Jose Luiz Martins
Beneficiário:Jose Luiz Martins
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Cirurgia pediátrica  Intestinos  Gastroenteropatias  Enterocolite necrosante  Hipóxia 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Arginina | enterocolite necrosante | Hipoxia | intestino | Precondicionamento Isquêmico | Ratos | Wistar | Cirurgia Pediátrica

Resumo

Considerando-se que a prematuridade é uma situação clínica comum nos pacientes com enterocolite necrozante, e também que o parto prematuro é uma situação previsível em algumas situações, decidiu-se verificar a hipótese de que a L-Arginina e/ou o pré-condicionamento isquêmico remoto na fase intra-uterina promoveria uma prevenção da lesão intestinal induzida por hipoxia e reoxigenação neonatal. Para tanto serão utilizadas ratas prenhas e suas crias, distribuídas em 6 grupos: Grupo Ref (n=10) - Ratos recém-nascidos de rata prenha que não sofreu nenhuma intervenção; Grupo HR (n=10) - Ratos recém-nascidos de rata prenha, que não sofreu nenhuma intervenção, e que serão submetidos a hipóxia-reoxigenação; Grupo Larg: (n=10) ratos recém-nascidos de rata prenha que receberá pré-tratamento com L-arginina 24 horas antes do parto; Grupo Larg-pos: (n=10) ratos recém-nascidos que receberão pré-tratamento com L-Arginina e submetidos à hipóxia-reoxigenação; Grupo PCI: (n=10) ratos recém-nascidos de rata prenha que será submetida ao precondicionamento isquêmico remoto 24 horas antes do parto; Grupo Larg+PCI: (n=10) ratos recém-nascidos de rata prenha que receberá pré-tratamento com L-arginina e será submetida ao precondicionamento isquêmico remoto 24 horas antes do parto. O pré-condicionamento isquêmico remoto (PCI e Larg+PCI) será realizado no vigésimo dia de gestação (aproximadamente 24 horas antes do parto) por meio de torniquete na região proximal da pata posterior esquerda promovendo uma isquemia por 10 minutos, e remoção após este período, permitindo a reperfusão. As ninhadas de todos os grupos, exceto do grupo Ref, serão colocadas, a partir do primeiro dia de vida, por 5 minutos em uma câmara de CO2 a 100% e a seguir 5 minutos de O2 a 100%, 2 vezes ao dia por 3 dias consecutivos. No 4º dia de vida, as crias serão anestesiadas com tionembutal, na dose de 30mg/kg, para remoção cirúrgica do intestino, sendo em seguida sacrificadas por aprofundamento do plano anestésico. Os intestinos, após análise macroscópica de lesão isquêmica, serão seccionados e segmentos do íleo terminal e do cólon ascendente serão guardados para análise posterior. Segmentos de ambas as porções serão fixados em formol 10% tamponado, para análise histológica por coloração de HE e imunohistoquímica para proteínas S-100 e Enolase neurônio específica, e outros segmentos serão mantidos em freezer 70oC, para a análise da peroxidação lipídica por determinação de aldeído malônico (MDA). (AU)

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