Desenvolvimento e validação de um diagnóstico comercial para detecção de Salmonelose Aviária utilizando a técnica de amplificação isotérmica mediada por Pool (LAMP)

• Processo: 09/53711-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Pesquisa Inovativa em Pequenas Empresas - PIPE
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Adriano Stefani Rubini
• Beneficiário: Adriano Stefani Rubini
• Empresa: Vetdna Diagnósticos Moleculares Ltda
• Assunto(s): Salmonella Técnicas e procedimentos diagnósticos Colorimetria
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Molecular | Colorimetria | Diagnostico | Lamp | Pcr | Salmonella

Resumo

O Brasil é atualmente o líder mundial de exportadores de carne de frango e assume o terceiro lugar em produção. As doenças entéricas assumem considerável importância para o setor avícola devido às perdas de produtividade, aumento de mortalidade e riscos zoonóticos. A salmonelose, zoonose de distribuição mundial é responsável por infecções em humanos, frequentemente associada ao consumo de produtos avícolas contaminados. Os métodos convencionais para detecção de Salmonella seguem o esquema de Kauffman- White, entretanto, este método é laborioso, exige muitos dias de trabalho, necessita de técnicos altamente treinados, e de componentes de alto custo. Os laboratórios liberam o exame de Salmonella spp em até 10 dias, e o de sorotipagem em até 60 dias. Todavia, para garantir que medidas de controle possam ser implementadas a tempo de se conter os avanços da doença, nas granjas, diagnósticos rápidos, precisos, de baixo custo e fácil execução tem sido o grande objetivo de muitos estudos. Recentemente, o ensaio de amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP) foi desenvolvido como uma alternativa para detecção de diferentes patógenos; as reações são altamente específicas e realizadas em temperatura constante (60-65°C) sendo completadas em aproximadamente 60 minutos. Nosso projeto objetiva o desenvolvimento de um diagnóstico comercial que seja inovador em termos de tempo, custo, praticidade e reprodutibilidade, para detecção de Salmonella spp. e de seus sorotipos mais importantes para as granjas. O método será baseado na combinação de técnicas bacteriológicas e de biologia molecular. Durante a fase 1 será padronizado um diagnóstico para o gênero Salmonella, que demonstrará a viabilidade da técnica proposta. Para a fase 2, serão desenvolvidos, testados e aplicados em escala comercial diagnósticos para quatro sorotipos específicos de Salmonella spp .. Todo dado obtido em cada uma das fases será comparado com os resultados obtidos pelas granjas com métodos tradicionais, de isolamento e caracterização, realizados por laboratórios de referência. Como resultado esperamos instituir um diagnóstico molecular inovador, para Salmonelose, que seja capaz de produzir um resultado em até 36 horas após o recebimento das amostras, e que tenha preços competitivos aos praticados atualmente no mercado. O impacto comercial deste tipo de diagnóstico refletirá diretamente na cadeia produtiva da avicultura nacional, permitindo que medidas de contenção sejam tomadas mais rapidamente e que consequentemente, sejam menores os gastos com o impacto da salmonelose nas granjas e, assim se mantenha o atual status de exportação possibilitando ainda a conquista de novos mercados. (AU)