Detecção de DNA do vírus da hepatite B em doadores de sangue negativos para o antígeno HBs e positivos para o anticorpo anti-HBc

• Processo: 99/12529-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2000
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2002
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Vanda Dolabela de Magalhães
• Beneficiário: Vanda Dolabela de Magalhães
• Instituição Sede: Instituto Israelita de Ensino e Pesquisa Albert Einstein (IIEPAE). São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Auxílio(s) vinculado(s): 02/14108-3 - Kit para detecção do vírus da Hepatite B, AP.PAPI
• Assunto(s): Hepatite viral humana Hepatite B DNA viral Biomarcadores Transfusão de sangue Contaminação Técnicas e procedimentos diagnósticos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diagnostico | Hbv | Nested-Pcr | Sondas Fluorescentes

Resumo

O desenvolvimento de hepatite do tipo B pós-transfusional é um problema de saúde pública. O Ministério da Saúde requer que sejam desprezadas bolsas de sangue positivas para os marcadores sorológicos antígeno HBs (AgHBs) e anticorpo anti-HBc. Esta exigência, entretanto, não exclui bolsas que de fato apresentam DNA viral, mesmo na ausência de marcadores sorológicos. Por outro lado, são desprezadas bolsas que não possui carga viral infectante. Os testes comerciais para detecção de DNA viral são extremamente sensíveis e caros. As metodologias caseiras descritas até o momento pecam pela falta de sensibilidade ou pelo risco de contaminação cruzada (nested-PCR). Propomos a utilização de "nested-PCR" em um único tubo, seguida de hibridização com uma sonda que fluoresce ao se ligar ao alvo. O tubo é mantido fechado durante todo o processo, diminuindo os riscos de contaminação e aumentando a sensibilidade. A reavaliação das condições seguras para a transfusão de hemoderivados justifica-se pela escassez de um produto essencial para a saúde de muitos e pode contribuir para a diminuição do risco residual de contaminação por HBV. (AU)