Anticorpos IgY identificadores de câncer ovariano: produção e validação: estudo piloto

• Processo: 11/50005-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Wilmar Dias da Silva
• Beneficiário: Wilmar Dias da Silva
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/18791-9 - Anticorpos IgY identificadores de câncer ovariano: produção e validação: estudo piloto, BP.TT
• Assunto(s): Anticorpos Neoplasias ovarianas Biomarcadores
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | Biomarcadores De Cancer | Cancer De Ovario | Igy | Imunodiagnostico

Resumo

Dois peptídeos, Pep.NPIIbA #1 e Pep.NPIIbB #2, foram delineados da proteína 2b-(NaPi2b) transportadora de fosfato dependente de sódio e ligados covalentemente a transportador immunologicamente compatível. Transportador - peptídeos foram usados para imunizar galinhas poedeiras. Anticorpos IgY foram purificados da gema de ovos, quantificados por ELISA e peptídeos ligados ao transportador identificados por Western blot. O método desenvolvido permite produzir anticorpos IgY monoespecíficos, de títulos elevados, de alta atividade específica e de baixo custo tanto anti- Pep.NPIIbA #1 como Pep.NPIIbB #2. O uso de galinhas foi aprovado pelo "Comitê de Ética em Pesquisa com Animais" "Centro de Biociências e Biotecnologia- Universidade Estadual do Norte Fluminense – Darcy Ribeiro". Esta proposta visa validação dos anticorpos IgY desenvolvidos como identificadores de marcadores de câncer de ovário humano. Mulheres, pacientes com diagnóstico definido de neoplasia de ovário ou outra neoplasia não ativa serão selecionadas. Antes de serem incluídas no protocolo serão informadas dos objetivos da proposta do estudo e, se concordarem com a participação, serão incluídas após a assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido. Amostras de sangue serão coletadas por processos de rotina, duplamente identificadas, com dados de registro do hospital e código, a presença de marcadores de câncer de ovário pesquisada em ensaios paralelos usando anticorpos IgY anti-peptídeos e o anticorpo monoclonal OC-125 anti CA-125, uma glicoproteína. Validação inclui os seguintes estágios: 1) Determinação da adequabilidade dos anticorpos IgY anti-peptídeos como identificadores; 2) Otimização e padronização do protocolo e dos reagentes; 3) Avaliação do desempenho dos reagentes e do protocolo; 4) Monitoramento contínuo do desempenho; e, 5) Manutenção e aprimoramento dos critérios de validação ao longo dos testes de rotina. Este estudo foi aprovado pelo "Comitê de Ética em Pesquisas Médicas" do Instituto do Câncer do Estado de São Paulo. (AU)