Análise da expressão diferencial do gene da capa protéica do citrus tristeza vírus

• Processo: 03/02426-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2005
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Luísa Penteado Natividade Targon
• Beneficiário: Maria Luísa Penteado Natividade Targon
• Instituição Sede: Instituto Agronômico (IAC). Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios (APTA). Secretaria de Agricultura e Abastecimento (São Paulo - Estado). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Análise de sequência de DNA Expressão gênica Vírus de plantas Plantas hospedeiras Tristeza cítrica Citricultura Citrus Laranja Tangerina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citrus Tristeza Virus | Expressao Diferencial De Genes | Hospedeiros | Qpcr

Resumo

O citrus tristeza vírus (CTV) apresenta alta diversidade genética, que é refletida em sua diversidade biológica, em função da maior ou menor suscetibilidade do hospedeiro. Ainda não existem informações sobre mecanismos de interação entre diferentes isolados do vírus e diferentes hospedeiros, como laranja doce, tangerinas e outras espécies de citros. Uma maneira de acompanhar essa interação é através da expressão de genes do vírus em função de mudanças de hospedeiro. Para tanto, serão avaliados nesse projeto dois complexos de CTV (o complexo Pêra IAC, considerado protetivo e fraco, e o complexo Capão Bonito, altamente severo), tanto em laranja Pêra (sensível ao vírus) quanto em tangerina Poncan (tolerante ao vírus). O complexo viral será inoculado por enxertia de borbulhas de plantas infectadas em plantas livres de vírus e acompanhado durante 3 meses após inoculação. Será avaliada a expressão diferencial do gene da p25 (proteína do capsídeo) através de PCR em tempo real, também conhecido como PCR quantitativo (qPCR). As principais etapas do projeto incluem a clonagem e sequenciamento do gene, desenho de 'primers' e 'sondas'para qPCR, estabelecimento de curva padrão de qPCR, ajuste da metodologia de RT-PCR para avaliação de material de planta, qPCR e quantificação da expressão. Através da execução do projeto, espera-se obter informações relevantes de como se dá a expressão diferencial desse gene do CTV em função da suscetibilidade ou tolerância da espécie de citros. (AU)