Aplicação dos princípios de evolução in vitro em estudos de função e estrutura da hipoxantina-guanina-fosforribosil-transferase de Leishmania tarentolae

• Processo: 98/14979-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2004
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Otavio Henrique Thiemann
• Beneficiário: Otavio Henrique Thiemann
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 02/01883-9 - Estudos moleculares das triptofanil-tRNA-sintetases mitocondriais humana e de Leishmania, BP.DD; 01/10216-3 - Caractarizacao molecular de enzimas envolvidas na via de reciclagem de purino-nucleotideos de leishmania major., BP.DR; 00/14734-6 - Estudos estruturais e comparativos da enzima glicose 6-fosfato isomerase de Kinetoplastidae, BP.DR; 00/14960-6 - Estudos estruturais e comparativos da enzima glicose-6-fosfato isomerase de humano e de Leishmania mexicana, BP.DR; 99/08475-9 - Aplicação dos princípios de evolução in vitro em estudos de função e estrutura da hipoxantina-guanina-fosforribosil-transferase de Leishmania tarentolae, BP.JP
• Assunto(s): Hipoxantina fosforribosiltransferase Enzimas Guanina Hipoxantina Leishmania DNA Cristalografia Evolução molecular Mutagênese
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aprt | Cristalografia | Dna Shuffing | Evolucao Molecular | Hgprt | Mutagenese
• Publicação FAPESP: https://media.fapesp.br/bv/uploads/pdfs/Investindo...pesquisadores_99_109_109.pdf

Resumo

As leishmanioses estão dentre as mais devastadoras doenças humanas. Entretanto não se possui uma medida de tratamento eficiente e segura dos indivíduos infectados. Estes organismos se destacam por serem auxotróficos para purinonucleotídeos. Com a finalidade de desenvolver novas formas de quimioterapia, a via de recuperação se apresenta como uma ideia candidata a esse fim. Objetivando complementar a pesquisa em andamento pretendemos empregar técnicas de evolução in vitro (DNA shuffling) para a seleção de mutantes do gene HGPRT de Leishmania. Esses serão sequenciados e estudos cinéticos serão realizados. As enzimas mutadas poderão ser posteriormente cristalizadas e sua estrutura resolvida. Esta informação levará a um melhor entendimento do mecanismo de catálise e ao desenho de inibidores. (AU)