Caracterizacao da transcricao var de plasmodium falciparum 3d7: associacao de fenotipos adesivos com transcritos dominantes

• Processo: 08/00430-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2008
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Gerhard Wunderlich
• Beneficiário: Gerhard Wunderlich
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Malária Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antigenic variation | cytoadherence | Real Time PCR | var genes | Malaria

Resumo

Citoaderencia de hemácias infectadas com P. falciparum é causada pelas proteinas Plasmodium-falciparum erythrocyte membrane 1 codificadas pela familia dos genes var com 50-60 membros por genoma. Enriquecimento de parasitas fenotipicamente homogeneos por panning é prerequisito pela identificação do transcrito var correspondente. Parasitas P. falciparum 3D7 foram paneados em diferentes lineagens de celulas CHO e seus transcritos var analisados por transcrição reversa seguida por real time PCR ou PCR com oligos degenerados seguido por clonagem e sequenciamento. Cada linhagem de parasitas aderiu também em células não transfectadas CHO-745 e o transcrito do gene var PFD0995/1000c foi associado com todas as linhagens de parasitas menos uma. Adicionalmente, parasitas selecionados em diferentes linhagens CHO revelaram genes var candidatos que reprodutivelmente podiam ser associados com os respectivo fenótipo adesivo. O perfil de transcrição var variou significantemente entre real time PCR e RT-PCR seguido por clonagem e sequenciamento. (AU)