Estudo das quinases dependentes de ciclinas humanas envolvidas na regulação transcricional

• Processo: 07/05000-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Fernanda Canduri
• Beneficiário: Fernanda Canduri
• Instituição Sede: Instituto de Química de São Carlos (IQSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Julio Cesar Borges
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/12198-4 - Expressão, isolamento e caracterização da ciclina L1 e sua interação com CDKs envolvidas na regulação transcricional, BP.IC; 11/12193-2 - Apoio Técnico ao Laboratório de Biologia Molecular e Bioquímica, BP.TT; 09/00686-4 - Estudo da quinase dependente de ciclina 8, BP.TT
• Assunto(s): Ligantes Proteínas recombinantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estudo Estrutural | Estudo Funcional | Isolamentos | Ligantes | Proteina Recombinante | Quinases Dependentes Ciclina | Química de proteínas
• Publicação FAPESP: https://media.fapesp.br/bv/uploads/pdfs/Investindo...pesquisadores_82_98_98.pdf

Resumo

Quinases dependentes de ciclinas (CDKs) compreendem uma família de proteínas que podem ser subdivididas em dois grupos funcionais majoritários baseados na sua função no ciclo celular e/ou controle transcricional. Já foram identificadas 13 CDKs humanas (CDK1-CDK13). A CDK2 é o membro melhor caracterizado, funcional e estruturalmente. As CDKs 7, 8, 9, 10 e 11 são importantes reguladores transcricionais. O fator geral de transcrição TFIIH contém a CDK7-ciclina H e o complexo de proteínas associadas aos hormônios da tireoide contem a CDK8-ciclina C. A CDK9-ciclina T1 pertence ao fator de elongação da transcrição P-TEFb, conhecidos por fosforilar o CTD da subunidade maior da RNAP II, tão bem quanto os passos subsequentes da expressão gênica. Os complexos da CDK10 se associam com o fator de transcrição Ets2, e a CDK11 associa-se com a CK2, e está envolvida com “splicing” de RNA, além de ser um regulador transcricional. A CDK9 foi recentemente clonada e expressa em E. coli, mas há poucos estudos funcionais e estruturais relacionados a ela. As referidas CDKs serão clonadas, expressas e purificadas seguindo o protocolo estabelecido para a CDK9, e de posse dessas proteínas, estudos estruturais e funcionais serão realizados. Estas proteínas serão bioquimicamente caracterizadas e ensaios da atividade enzimática na presença de inibidores serão realizados. Serão realizados ainda estudos das estruturas secundárias por técnicas de dicroísmo circular e das estruturas terciárias, pela cristalização das referidas CDKs, e consequente, a resolução das estruturas. O estudo das CDKs envolvidas na regulação transcricional irá contribuir para o entendimento da relação estrutura-função destas CDKs, e sua relação com oncogenes e supressores de tumor. O estudo estrutural irá contribuir para o desenvolvimento de inibidores químicos de baixo peso molecular que possa inibir especificamente estas CDKs. (AU)